HO-1系統(tǒng)在肝臟缺血再灌注中的作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討HO-1減輕肝臟缺血再灌注損傷的機(jī)制，為臨床器官移植預(yù)防缺血再灌注損傷提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：本研究采用Sprague-Dawley(SD)大鼠為供體和受體，建立二套袖法原位肝移植模型。將40只雄性SD大鼠隨機(jī)分為4組，每組5對(duì)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及處理：第一組對(duì)照組，無(wú)任何處理。第二組CoPP處理組，供肝收獲前24小時(shí)供體腹腔注射CoPP 5mg/kg。第三組ZnPP處理組，供肝收獲前24小時(shí)供體腹腔注射ZnpP 20mg/

2、kg。第四組MC處理組，供肝收獲前7天，供體每天口服MC 500 mg/kg。檢查項(xiàng)目如下：(1)供體移植物收獲前肝功能及COHb/Hb％。(2)移植后第三天肝臟移植物肝功能。(3)應(yīng)用Western blot和免疫組織化學(xué)等方法檢測(cè)肝臟移植物HO-1的表達(dá)變化。(4)TUNEL 法檢測(cè)移植后肝臟移植物凋亡變化情況。(5)肝臟移植物常規(guī)病理檢查，并以Suzuki標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分來(lái)反映肝臟移植物的缺血再灌注損傷程度。 結(jié)果：(1)處理后供

3、體的COHb/Hb％：對(duì)照組(0.85±0.13)，ZnPP組(0.18±0.08)，CoPP組(1.03±0.68)，MC組(2.164±0.74)。MC組COHb/Hb％比其他組明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。(2)移植后肝臟移植物肝功能：MC組ALT(754±16.2)，AST(195.2±41.8)與對(duì)照組ALT(346.44±45.1)，AST(474.4±89.7)和 ZnPP組ALT(577.84±75.3)，AS

4、T(1084.4±127.9)明顯降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。(3)Western blot和免疫組織化學(xué)檢測(cè)肝臟移植物的HO-1表達(dá)：CoPP組明顯高于其他組(P<0.05)。對(duì)照組與MC組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。(4)移植物凋亡陽(yáng)性細(xì)胞百分率：MC組(4.14±0.6)、CoPP組(3.2±0.8)明顯低于對(duì)照組(12.54±2.4)和ZnPP組(25.84±3.1)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。(5)肝臟移植物病

5、理變化： CoPP組和MC組與對(duì)照組，ZnPP組比較，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)少，肝細(xì)胞損傷輕。肝臟移植物Suzuki評(píng)分，CoPP組(0.76±0.59)，MC組(0.76±0.52)明顯低于對(duì)照組(1.32±0.74)，ZnPP組(1.80±0.70)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。 結(jié)論：(1)HO-1上調(diào)對(duì)肝臟移植物缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。機(jī)制與其產(chǎn)物CO的抗炎癥與抗凋亡有關(guān)。(2)與HO-1類似，二氯甲烷對(duì)肝臟移植物缺血再灌注損