飲食中脂肪與膽固醇比例的不同對大鼠CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細胞的影響.pdf

1、【目的】
　　觀察CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細胞(Treg)在不同比例的脂肪與膽固醇飲食導致的大鼠肝臟不同程度脂肪變中的變化,探討Treg在非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中的免疫調(diào)節(jié)作用。
　　【方法】
　　同周齡體重雄性SD大鼠50只,隨機分為以下五組:1、對照組(100％普通飼料)10只;2、低脂肪組(4%豬油+96%普通飼料)10只;3、高脂肪組(10%豬油+90%普通飼料)10只;4、低脂肪+膽固

2、醇組(4%豬油+2%膽固醇+94%普通飼料)10只;5、高脂肪+膽固醇組(10%豬油+2%膽固醇+88%普通飼料)10只。
　　飼養(yǎng)20周末處死各組大鼠,全自動生化分析儀測定肝功能、血脂,應(yīng)用流式細胞術(shù)檢測外周血Treg占CD4+T細胞的比例,HE染色觀察肝組織脂肪變情況,運用RT-PCR和WesternBlot檢測肝組織Foxp3的表達。
　　【結(jié)果】
　　1、HE染色示大鼠脂肪變程度:對照組為(-),低脂肪組3只為

3、(-),7只為(+),高脂肪組6只為(+),4只為(++),低脂肪+膽固醇組和高脂肪+膽固醇組1只死亡,3只為(++)余16只均為(+++),其中11只伴炎癥細胞浸潤和肝細胞點灶狀壞死。
　　2、流式細胞術(shù)檢測外周血Treg占CD4+T細胞的比例:低脂肪組顯著高于對照組(P<0.01),高脂肪組與對照組無顯著差異(P>0.05),低脂肪+膽固醇組和高脂肪+膽固醇組均顯著低于對照組(P<0.01)。實驗組中,高脂肪組顯著低于低脂肪組

4、(P<0.01),低脂肪+膽固醇組顯著低于高脂肪組(P<0.01),高脂肪+膽固醇組與低脂肪+膽固醇組比較無顯著差異(P>0.05);低脂肪+膽固醇組較低脂肪組顯著降低(P<0.01),高脂肪+膽固醇組較高脂肪組顯著降低(P<0.01)。
　　3、RT-PCR檢測肝組織Foxp3mRNA的表達:低脂肪組顯著高于對照組(P<0.01),高脂肪組與對照組無顯著差異(P>0.05),低脂肪+膽固醇組和高脂肪+膽固醇組均顯著低于對照組(P

5、<0.01)。實驗組中,高脂肪組顯著低于低脂肪組(P<0.01),低脂肪+膽固醇組顯著低于高脂肪組(P<0.01),高脂肪+膽固醇組與低脂肪+膽固醇組比較無顯著差異(P>0.05);低脂肪+膽固醇組較低脂肪組顯著降低(P<0.01),高脂肪+膽固醇組較高脂肪組顯著降低(P<0.01)。
　　4、Westernblotting檢測肝組織Foxp3蛋白的表達:低脂肪組顯著高于對照組(P<0.01),高脂肪組與對照組無顯著差異(P>0.

6、05),低脂肪+膽固醇組和高脂肪+膽固醇組均顯著低于對照組(P<0.01)。實驗組中,高脂肪組顯著低于低脂肪組(P<0.01),低脂肪+膽固醇組顯著低于高脂肪組(P<0.01),高脂肪+膽固醇組與低脂肪+膽固醇組比較無顯著差異(P>0.05);低脂肪+膽固醇組較低脂肪組顯著降低(P<0.01),高脂肪+膽固醇組較高脂肪組顯著降低(P<0.01)。
　　【結(jié)論】
　　1、飲食中膽固醇對NASH的發(fā)生可能具有十分重要的作用,脂肪