應(yīng)用血清蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)篩選和鑒定舌癌腫瘤抗原.pdf

1、目的：探索應(yīng)用血清蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)分離和鑒定頭頸部腫瘤標(biāo)志物，尋找舌癌早期診斷、病程監(jiān)測(cè)以及預(yù)后判斷的血清學(xué)指標(biāo)。建立血清蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)平臺(tái)，為今后的研究奠定基礎(chǔ)。 方法：通過裸鼠皮下多點(diǎn)接種人舌癌細(xì)胞(Tca8113)，建立移植瘤動(dòng)物模型。在成瘤后收集血清，對(duì)血清樣品進(jìn)行預(yù)處理，去除高豐度的白蛋白。采用雙向聚丙烯酰氨凝膠電泳分離血清中的蛋白，通過考馬斯亮藍(lán)染色和硝酸銀染色，對(duì)比實(shí)驗(yàn)組與差異組的血清蛋白譜。利用PD-Quest分析

2、軟件尋找差異表達(dá)的蛋白，通過基質(zhì)輔助激光解吸飛行時(shí)間質(zhì)譜鑒定目的蛋白。收集臨床舌癌患者的血清和手術(shù)標(biāo)本，利用RT-PCR、WesternBlotting以及免疫組化染色技術(shù)，驗(yàn)證目的蛋白在mRNA以及蛋白質(zhì)水平上的差異表達(dá)。 結(jié)果：通過雙向凝膠電泳，分離和鑒定了5個(gè)差異表達(dá)的蛋白。其中鱗狀細(xì)胞癌抗原-1與舌癌密切相關(guān)。通過RT-PCR、WesternBlotting以及免疫組化染色技術(shù)，發(fā)現(xiàn)鱗狀細(xì)胞癌抗原-1的mRNA在舌癌組織