喹賽多在豬、雞和鯉可食性組織中的殘留消除研究.pdf

1、喹賽多作為喹噁啉類新藥，對畜禽及水產(chǎn)品中常見病原菌有良好的抑菌作用，并且能夠提高飼料轉(zhuǎn)化率，促進(jìn)機(jī)體生長。與同類藥物相比，喹賽多具有安全性更高、毒副作用更低的特點(diǎn)。而作為食品動物用藥，對其安全性評價是新藥開發(fā)的重要內(nèi)容。獸藥殘留是影響食品安全的主要因素，但是關(guān)于喹賽多在畜禽及水產(chǎn)品中的殘留消除研究并沒有完全清楚。目前國際上公認(rèn)的可食性組織包括肝、腎、肌肉、脂肪，而在我國，除了肝、腎、肌肉和脂肪外，主要的可食性組織還有心、肺、胃、大腸和小

2、腸。目前關(guān)于喹賽多的殘留消除研究已在畜禽的肝、腎、肌肉、脂肪中開展，但是喹賽多在心、肺、胃、大腸和小腸中的殘留消除研究仍未見報道。本課題以豬、雞和鯉魚為研究對象，建立了喹賽多及其5種主要代謝產(chǎn)物在各可食性組縱中殘留檢測的高效液相色譜方法，并對這些化合物的殘留消除規(guī)律進(jìn)行研究。本研究表明，喹賽多用于豬、雞和鯉之后，吸收和消除迅速。通過本研究進(jìn)一步確定了喹賽多在豬和雞體內(nèi)的殘留靶組織是腎臟，殘留標(biāo)示物是Cy1;在鯉體內(nèi)的殘留靶組織是胃腸，殘

3、留標(biāo)示物是Cy1。闡明了喹賽多在動物體內(nèi)的安全性，為食品安全評價提供理論依據(jù)和技術(shù)支持。
　　1殘留檢測方法的建立
　　本實(shí)驗(yàn)建立了喹賽多(Cy0)、脫二氧喹賽多(Cy1)、N4-脫一氧喹賽多(Cy2)、N-（喹噁啉-2-甲基）-氰乙酰肼(Cy4)、喹噁啉-2-羧酸(Cy6)和2-氰基-N'-(N1-氧喹噁啉-2-亞甲基)乙酰肼(Cy9)六種化合物在豬和雞的肝臟、腎臟、肌肉、脂肪、心、肺、胃、大腸和小腸9種可食性組織;鯉魚的

4、肝臟、腎臟、肌肉、脂肪、皮膚和胃腸道6種可食性組織中的殘留檢測方法。各組織依次通過乙酸乙酯提取、體積比為1∶50∶10∶39的甲酸∶甲醇∶乙腈∶水復(fù)合試劑提取、正己烷去脂和親水親脂平衡型共聚物(HLB)小柱凈化，最后經(jīng)體積比為15∶85的乙腈∶水混合試劑復(fù)溶，320 nm紫外波長下通過高效液相色譜進(jìn)行檢測。該方法下Cy0、Cy1和Cy6在豬和雞的肌肉、心臟、肺臟及魚的肌肉、皮膚和胃腸的定量限為15μg/kg，在豬和雞的肝、腎、脂肪、胃、

5、大腸和小腸及魚肝、腎和脂肪中的定量限為20μg/kg; Cy2、Cy4和Cy9在豬和雞的肌肉、心臟、肺臟及魚的肌肉、皮肽和胃腸的定量限為20μg/kg，在豬和雞的肝、腎、脂肪、胃、大腸和小腸及魚肝、腎和脂肪中的定量限為40μg/kg。添加不同定量限水平上濃度的藥物，回收率在均在60％以上，且日間變異系數(shù)在12％以下。農(nóng)業(yè)部規(guī)定殘留檢測方法日間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差17％-21％，本實(shí)驗(yàn)建立的方法滿足該要求，能用于喹賽多及其代謝產(chǎn)物的定量分析。

6、r>　　2喹賽多在豬、雞和鯉體內(nèi)的殘留消除研究
　　健康三元雜交豬25頭、20日齡科寶肉雞30羽和健康鯉魚30尾，各分成5組。連續(xù)飼喂添加200 mg/kg喹賽多的飼料2周，停藥后于不同時間點(diǎn)宰殺一組，收肝臟、腎臟、肌肉、脂肪、心、肺、胃、大腸和小腸。按上述方法對組織中藥物的含量進(jìn)行測定，結(jié)果如下:
　　豬:停藥6h，除脂肪外各組織均檢測到原形和QCA，藥物濃度范圍分別為21.8-66.3μg/kg和22.4-56.9μg/

7、kg;各組織中均檢測出Cy1,濃度范圍是20.4-66.0μg/kg，原形和QCA在豬體內(nèi)消除迅速。停藥1d，各組織中原形均消除至定量限以下，腎臟和肺臟中檢測出QCA，濃度分別為22.3μg/kg和25.1μg/kg;肝、腎、肺和小腸中檢測到Cy1，濃度范圍是20.8-44.2μg/kg，腎臟最高。停藥3d，各組織中QCA均消除至定量限以下，只有腎臟中能檢測到少量的Cy1。停藥7d各組織中Cy1均低于定量限。
　　雞:肌肉和脂肪沒

8、有檢測到任何代謝產(chǎn)物。停藥6h，原形藥物只在肝臟、腎臟、小腸、心、肺和胃中檢測出，濃度范圍是21.4-67.2μg/kg，腎臟最高;肝臟、腎臟、心臟、肺臟和小腸中均檢測到QCA，濃度范圍為24.7-66.8μg/kg，腎臟中最高;肝臟、腎臟、心、肺、大腸和小腸檢測出Cy1，濃度范圍是32.8-65.6μg/kg。停藥1d，原形和QCA僅在腎臟中檢測出，濃度分別為34.1和32.5μg/kg;在肝、腎和肺中檢測出Cy1，濃度分別為32.0

9、、47.4和23.0μg/kg。停藥3d，僅在腎中檢測出少量的Cy1。停藥5d，各組織中檢測不到任何代謝產(chǎn)物。
　　鯉:停藥6h，各組織中除原形、脫二氧喹賽多和QCA外，還在皮膚和胃腸中檢測出Cy4，在腎臟、肌肉、脂肪、皮膚和胃腸中檢測出原形，濃度范圍為15.2-25.5μg/kg腎臟居多;肝、腎、皮膚和胃腸中檢測到QCA，濃度范圍為20.2-36.1μg/kg;各組織中均檢測到Cy1，濃度范圍為32.4-40.8μg/kg，胃腸

10、最高。停藥1d，各組織中的原形和QCA均消除至定量限以下;除脂肪外各組織中均檢測到Cy1，濃度范圍20.5-36.8μg/kg，胃腸最高。停藥3d，僅胃腸道有少量的Cy1。停藥7d各組織中檢測不到任何代謝產(chǎn)物。
　　綜上所述，本實(shí)驗(yàn)首次建立喹賽多及其5種主要主要代謝產(chǎn)物在豬和雞9種可食性組織，魚6種可食性組織中的殘留檢測方法，同時，首次闡明了喹賽多及其代謝產(chǎn)物在這些組織中的消除規(guī)律，其研究結(jié)果為指導(dǎo)臨床合理用藥、藥物安全性評價和殘