喹賽多在魚的田間試驗.pdf

1、喹賽多是喹噁啉類品種之一，抗菌活性較強，促生長效果明顯。大量研究證明，喹賽多對許多病原菌均具有抑制作用，并能顯著促進豬、牛、羊、雞、兔及魚等動物的生長發(fā)育，分別提高它們對飼料的利用率；同時，與喹乙醇、卡巴氧等同類藥物相比，喹賽多對動物和人類更表現(xiàn)出安全性。因此，喹賽多是一種極具發(fā)展前景的抗菌促生長藥物。目前，國內外報道的關于喹賽多在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的研究，尚處于實驗室研究階段，對于在田間條件下的水產(chǎn)養(yǎng)殖動物生產(chǎn)中，喹賽多是否具有與試驗前期相類

2、似的抗菌促生長活性、靶動物安全性、人類食品安全性以及尚未開展的水環(huán)境安全性仍然有待試驗驗證。因此，開展喹賽多的Ⅲ期臨床試驗(即田間試驗)顯得尤為重要。
　　 本課題采用草魚(25～125 g)主養(yǎng)，鰱、鳙、鯽、鳊配養(yǎng)的混養(yǎng)模式。試驗前，將各魚種分別按體重歸類并隨機分為4組，每組2～3個重復池塘。預試20周左右，正式試驗15周左右。預試期投喂基礎日糧；正式試驗期分別以基礎日糧和基礎日糧中添加3種不同劑量喹賽多(藥物飼料相對比分別為

3、25 mg/kg、50 mg/kg和150mg/kg)制作的沉性硬顆粒飼料喂養(yǎng)試驗魚類。機械自動定點定時投餌，每天記錄飼料消耗量、魚類活動情況、疾病發(fā)生情況及其原因等，并適時觀察與記錄試驗魚在采食、生長、拉網(wǎng)、捕撈和運輸過程中的臨床表現(xiàn)。試驗期間，將草魚作為試驗的主要監(jiān)測與研究對象。每個池塘分別于試驗前后以拉網(wǎng)捕魚的方式獲取全部試驗魚，依次稱重后根據(jù)成魚漁獲量和魚種放養(yǎng)量分別計算畝放養(yǎng)量、畝毛產(chǎn)量和畝凈產(chǎn)量等；同時，根據(jù)試驗期間的餌料攝

4、取量計算畝飼料消耗量、餌料系數(shù)等相關參數(shù)；根據(jù)飼料生產(chǎn)成本價格和魚類市場監(jiān)測平均價格計算畝增重利潤等。在養(yǎng)殖試驗開始后第10周和第15周，每個劑量組的每個重復池塘隨機抽取6尾左右草魚，分別稱重后尾靜脈采血以觀測草魚的血液生理生化指標，解剖后稱取草魚脾臟、頭腎、腎臟和肝胰臟質量并計算各自的臟器相對重量(臟體指數(shù))；同時，采集草魚(包括上述取樣過程中的健康草魚以及試驗中后期的死亡草魚)脾臟、頭腎、腎臟和肝胰臟組織，做組織病理學檢查。此外，盡

5、量無菌采集草魚腮部和腸道，分別觀測3類水產(chǎn)常見菌群(包括假單胞菌、黃桿菌、氣單胞菌)和5種水產(chǎn)常見病原菌(包括熒光假單胞菌、柱狀黃桿菌、嗜水氣單胞菌、豚鼠氣單胞菌和溫和氣單胞菌)在草魚體內的種類和數(shù)量變化情況。養(yǎng)殖試驗結束后第0、1、2、3、4、5、7、10、14 d的每日14:00左右于150 mg/kg喹賽多處理組所對應的池塘采集水樣和底泥樣品，檢測喹賽多及其主要代謝物的殘留量，分析喹賽多在水體環(huán)境中的殘留降解情況。研究結果如下。<

6、br>　　 臨床表現(xiàn)及死魚病原病理：試驗魚采食、生長等臨床表現(xiàn)基本正常；在拉網(wǎng)、捕撈和運輸過程中，未發(fā)現(xiàn)類似于喹乙醇等喹噁啉類藥物的使用而出現(xiàn)的應激性中毒癥狀。試驗前期死魚經(jīng)解剖學與微生物檢查結果發(fā)現(xiàn)主要由赤皮病、細菌性腸炎和細菌性敗血癥所引起。試驗中后期死魚經(jīng)解剖學與組織病理學檢查結果發(fā)現(xiàn)各試驗組并未出現(xiàn)因喹賽多的使用而引起的中毒死亡現(xiàn)象。由此表明，喹賽多對魚類無明顯不良影響。
　　 喹賽多對魚類生產(chǎn)性能的影響：隨著喹賽多添

7、加濃度的增加，主養(yǎng)魚草魚的畝凈產(chǎn)量呈現(xiàn)明顯升高的現(xiàn)象。其中，25 mg/kg和150 mg/kg組草魚的畝凈產(chǎn)量與對照組相比分別平均提高了將近40%和100%；同時，喹賽多添加組所有養(yǎng)殖魚類的生長性能也要明顯高于空白對照組。另外，隨著喹賽多添加濃度的增加，魚類的采食量(畝飼料消耗量)和餌料系數(shù)均呈現(xiàn)明顯降低的現(xiàn)象。其中，25 mg/kg和150mg/kg組的餌料系數(shù)與對照組相比分別平均降低了將近30%和40%。此外，通過分析發(fā)現(xiàn)，隨著喹

8、賽多添加濃度的增加，魚類的畝增重收入和畝飼料成本分別呈現(xiàn)明顯升高或降低的現(xiàn)象，畝利潤則表現(xiàn)出整體升高的趨勢。其中，25 mg/kg和150 mg/kg組的畝增重利潤與對照組相比分別平均增收1000元左右和1600元左右。由此表明，日糧中添加喹賽多可促進魚類生長、降低餌料系數(shù)并提高水產(chǎn)養(yǎng)殖的經(jīng)濟效益。
　　 喹賽多對草魚生理生化指標的影響：血液分析顯示，除長期(15周)高劑量(150mg/kg)添加喹賽多引起草魚GLU水平發(fā)生顯著

9、性改變(p<0.05)以外，其它相關血液指標未發(fā)生明顯變化。由此表明，喹賽多對反應魚體病理變化的血液指標(如AST、ALT、ALP、LDH、CHO、TG、TB、DB、BUN和CRE等)均未產(chǎn)生顯著性影響。通過分析相關血液指標受喹賽多作用后的變化趨勢發(fā)現(xiàn)喹賽多在糖類代謝、脂肪代謝、蛋白質代謝等方面均表現(xiàn)出一定的調控與促進作用。
　　 喹賽多對草魚攜帶常見病原菌的影響：喹賽多對假單胞菌、黃桿菌和氣單胞菌等3種典型菌群均具有抑制作用，

10、當添加量達到50 mg/kg時，各菌群數(shù)量明顯降低。同時，在本試驗中并未分離獲得5種水產(chǎn)常見病原菌(包括熒光假單胞菌、柱狀黃桿菌、嗜水氣單胞菌、豚鼠氣單胞菌和溫和氣單胞菌)中的柱狀黃桿菌；針對其它幾種常見病原菌的數(shù)量變化情況，通過分析發(fā)現(xiàn)，喹賽多對幾種水產(chǎn)常見病原菌發(fā)生顯著性抑制的轉折點均發(fā)生在添加濃度為25 mg/kg或50 mg/kg時。由此表明，當喹賽多添加濃度為50 mg/kg左右時，喹賽多對各典型菌群和水產(chǎn)常見病原菌均具有相當

11、好的抑制作用。
　　 喹賽多對草魚臟體指數(shù)的影響：基礎日糧中添加不高于50 mg/kg喹賽多飼喂草魚時，不論養(yǎng)殖時間長短，各臟體指數(shù)與對照組相比均呈現(xiàn)增大趨勢，但無顯著性差異(p>0.05)；當添加濃度達到150 mg/kg時，頭腎、中腎、肝胰臟等臟體指數(shù)均呈現(xiàn)減小趨勢，但脾臟和頭腎指數(shù)仍然明顯高于或略高于空白對照組，方差分析顯示，它們之間并不存在顯著性差異(p>0.05)。由此表明，喹賽多對草魚臟器生長并未產(chǎn)生不良影響。相反，

12、通過低水平喹賽多對草魚臟器的生長促進作用預示了喹賽多在增強魚類非特異性免疫機能、造血機能以及排泄或代謝機能方面所起的積極作用。
　　 喹賽多對草魚常規(guī)組織顯微結構的影響：病理學檢查脾臟、頭腎、中腎和肝胰臟，未發(fā)現(xiàn)有毒理學意義的病理學改變，表明喹賽多對魚類無明顯不良影響。
　　 喹賽多及其代謝物在水體環(huán)境中的消長規(guī)律：喹賽多仍以原形藥物形式存在于水體環(huán)境中，并未檢測到其相關代謝產(chǎn)物。喹賽多在水中1 d就降解至殘留限量以下，

13、在底泥中4d即可降解至殘留限量附近，其在底泥中的生物降解半衰期僅為1.21d，初步表明喹賽多不會蓄積于環(huán)境并對環(huán)境產(chǎn)生毒害作用。其具體的降解機制以及對周圍環(huán)境的影響研究有待進一步開展。
　　 總之，本課題首次研究了喹賽多在田間條件下水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)中應用于魚的有效性和安全性。試驗結果與相關研究結果基本一致，證明喹賽多可作為一種較為理想的藥物性飼料添加劑應用于水產(chǎn)養(yǎng)殖中，且具有較為廣闊的開發(fā)與應用前景。在本課題中，通過喹賽多抗菌促生長

14、性能與靶動物安全性研究確證了喹賽多臨床使用的安全劑量范圍和最佳添加水平，此研究成果將為喹賽多在今后水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)中的合理安全應用提供科學的理論依據(jù)；同時，通過喹賽多環(huán)境安全性研究初步了解了喹賽多在環(huán)境中的降解規(guī)律以及喹賽多應用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的環(huán)境安全性；這對于生產(chǎn)安全的水產(chǎn)動物食品以及維護人類健康有著深遠的意義。喹賽多及其主要代謝物在環(huán)境基質中檢測方法的建立將為喹賽多在水體環(huán)境中的危害監(jiān)測與識別提供較為可靠的技術手段；本課題中相關研究技術與方