乙型肝炎病毒基因型與肝細(xì)胞癌臨床特征的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：建立用多對(duì)型特異性引物-聚合酶鏈反應(yīng)法檢測(cè)HBV的基因型。了解湖北地區(qū)HCC患者HBV基因型的分布；并探討不同基因型與肝癌臨床特征的相關(guān)性。 方法：利用多對(duì)型特異性引物-聚合酶鏈反應(yīng)法檢測(cè)HBV的基因型，選取分型為C基因型的樣本用高保真DNA聚合酶PCR經(jīng)分離、純化、篩選和酶切鑒定，獲得的陽(yáng)性克隆用CEQ2000XL全自動(dòng)測(cè)序儀測(cè)序，結(jié)果與Genebank發(fā)表的HBV序列進(jìn)行同源性分析，用最大相似法繪制HBV全S基因發(fā)生樹(shù)

2、，鄰近法驗(yàn)證。選擇湖北地區(qū)HBVDNA陽(yáng)性的慢性HBV感染患者297例，其中表面抗原攜帶者(ASC)52例、慢性肝炎(CHB)56例、重型肝炎32例、肝硬化22例和HCC135例，用多對(duì)型特異性引物-聚合酶鏈反應(yīng)方法檢測(cè)HBV的基因型；比較肝癌和肝炎患者基因型的分布；進(jìn)一步分析135例HBVDNA陽(yáng)性HCC患者HBV的基因型分布情況，分析HCC患者HBV基因型與HBVDNA水平和HBeAg陽(yáng)性率、ALTASTTBILAFP的水平、肝癌病

3、理分級(jí)及生存率等臨床特征的相關(guān)性。 結(jié)果：多對(duì)HBV型特異性引物-聚合酶鏈反應(yīng)法可以簡(jiǎn)易快速準(zhǔn)確鑒定HBV基因型。鑒定出297份HBVDNA陽(yáng)性血清標(biāo)本中，B基因型218例(73.4％)，C基因型65例(21.9％)，BC混合型14例(4.7％)，未發(fā)現(xiàn)A、D、和E基因型；我們比較CHB與HCC患者的HBV復(fù)制程度發(fā)現(xiàn)，HCC患者的血清HBVDNA水平和HBeAg陽(yáng)性率均顯著低于CHB。135例HCC患者中，B基因型102例(7

4、5.6％)、C基因型26例(19.2％)、BC混合基因型7例(5.2％)；不同年齡、性別和HBV基因型無(wú)明顯關(guān)系；C型HBVDNA水平及HBeAg陽(yáng)性率明顯高于B型；C型ALTASTTBILAFP的水平均較B型高，差異有顯著性；1年生存率B型84.42％，C型僅為69.57％；三組基因型與腫瘤病理分級(jí)之間無(wú)顯著性差異。 結(jié)論：確定多對(duì)型特異性引物-聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)HBV基因型的方法簡(jiǎn)易、快速、準(zhǔn)確；該方法可用于HBV基因型的流行