不同基因突變對特發(fā)性低促性腺激素性性腺功能減退癥患者的臨床特點、隱睪和生精療效的影響.pdf

1、目的：
　　 (1)在中國男性特發(fā)性低促性腺激素性性腺功能減退癥(IHH)患者中，明確基因突變的發(fā)生率是多少？各致病基因比重如何？
　　 (2)不同基因所致IHH，各有何臨床特點？這些臨床特點，能否提示某種基因突變？
　　 (3)有多少患者存在雙（寡）基因突變？和單基因突變的患者相比，雙（寡）基因突變的IHH患者，是否存在更嚴重的性腺軸功能損傷？
　　 (4)根據(jù)基因檢測和臨床表現(xiàn)（有無嗅覺）對IHH患者

2、進行亞組分析，評價不同患者人群的精子生成差異。
　　 方法：
　　 (1)基因研究:采用基因芯片(NimbleGen2.1M基因芯片組)，對IHH患者和部分家屬的19個IHH基因外顯子和相鄰內含子進行檢測。對每一個改變的堿基，通過多個數(shù)據(jù)庫進行多態(tài)性分析或突變狀態(tài)的檢測。利用SIFT和Polyphen-2計算機模擬軟件，對突變基因及其編碼蛋白質的功能進行預測。對明確的基因突變檢測結果，用經(jīng)典sanger PCR方法進行驗

3、證。根據(jù)基因突變情況，把患者分為明確基因突變組、可疑基因突變組、無效基因突變組和未檢測到基因突變組。
　　 (2)臨床研究:收集患者的臨床資料，包括性別、年齡、初診和隨訪中的睪丸體積、垂體前葉激素水平、生精治療后的睪酮水平、睪丸體積、精子數(shù)量和愛人妊娠情況。根據(jù)睪丸體積和生精治療的效果，對患者的精子生成能力進行半定量評分，分為0、1、2、3四個等級，稱為“生精指數(shù)”。分數(shù)越高，提示生精治療的效果越好，產(chǎn)生精子的可能性越大，精子數(shù)

4、量越多。
　　 (3)統(tǒng)計學方法:不同組之間的比較:對符合正態(tài)分布的連續(xù)性變量，采用非配對t檢驗;對符合正態(tài)分布的有序分類變量，采用Kruskal-Wallis檢驗。除非特殊說明，數(shù)據(jù)以平均值±標準誤(Mean±SE)表示。
　　 結果：
　　 (1)男性259例IHH患者中，明確基因突變87例(33.6％)，可疑基因突變35例(13.5％)，無效基因突變69例(26.8％)，未檢測到已知基因突變68例(26.2

5、％)。明確基因突變是指，基因突變已被報道過，或已通過體外試驗驗證了功能缺陷，或發(fā)生于剪切位點的堿基改變，或通過計算機模擬軟件（SIFT和Polyphen-2檢測方法）提示蛋白質功能受到明顯損害?？梢苫蛲蛔兪侵?發(fā)生率小于1％的SNP，或以常染色體隱性遺傳方式的致病基因發(fā)生雜合突變（即兩個等位基因中，有一個發(fā)生可導致氨基酸變化的突變）。無效基因突變是指，內含子（非剪切位點）存在異常或外顯子發(fā)生同義突變。未檢測到基因突變是指，IHH基因的

6、外顯子和相鄰內含子均無堿基改變。
　　 (2)明確基因突變組(N=87): CHD7基因突變16例(19.1％)，F(xiàn)GF8有2例(2.2％)，F(xiàn)GFR1有20例(22.5％)，GNRHR有4例(4.5％)，KAL1有14例(15.7％)，KISS1R有2例(2.2％)，LEPRE有1例(1.1％)，LHB有3例(3.4％)，NELF有1例(1.1％)，PROK2有4例(4.5％)，PROKR2有19例(21.3％)，WDR11有

7、1例(1.1％)。CHD7、KAL1、FGFR1和PROKR2是主要的突變基因，占明確基因突變組的79％。
　　 (3)在明確基因突變組(N=87):三基因突變有2例(2.2％)，雙基因突變18例(20.7％)，單基因突變67例(77.0％)。單基因突變和雙（寡）基因突變組之間，初始睪丸體積、生精指數(shù)無顯著性差異。
　　 (4)在FGFR1、CHD7、KAL1和PROKR2突變導致IHH的四組患者中，F(xiàn)GFR1突變組的初

8、始睪丸體積和生精指數(shù)顯著低于其他三組。
　　 (5)明確基因突變組(N=87)的生精指數(shù)顯著低于可疑基因突變組(N=35)(0.99±0.08 vs.1.47±0.14，P=0.003)和未檢測到基因突變組(N=68)(0.99±0.08 vs.1.37±0.10，P=0.003)。明確基因突變組的nIHH患者(N=31)，生精指數(shù)顯著低于未檢測到基因突變組的nIHH患者(N=30)(1.09±0.13vs.1.70±0.10，

9、P=0.0006)。而明確基因突變組的KS(N=56)的生精指數(shù)和未檢測到基因突變組的KS(N=38)無顯著性差異。
　　 (6)根據(jù)基因型和臨床嗅覺表型對IHH患者進行分類，生精指數(shù)從低到高分別是:FGFR1突變組＜KS+明確基因突變的nIHH患者＜未檢測到基因突變的nIHH患者。
　　 (7)無論在明確基因突變組內還是未檢測到基因突變組內，nIHH患者的BMI均高于KS患者。在全部IHH患者中，nIHH人群BMI大于

10、KS人群。
　　 (8)不同基因突變和臨床特異表現(xiàn)之間的相關性:有家族史的患者更易檢出KAL1突變。FGFR1突變患者可有矮小、唇腭裂和牙齒發(fā)育異常。KAL1和CHD7突變均可發(fā)生單側腎臟發(fā)育不良。
　　 (9)有7例(2.7％) IHH患者的性腺軸功能發(fā)生逆轉。其中KAL1基因突變2例，PROKR2和LHB突變各1例。其他3例未檢測到基因突變?；颊叱踉\年齡22.4±0.8歲，確定逆轉的年齡為25.1±0.7歲;此人群的

11、GnRHa（曲普瑞林）興奮試驗LH峰值為19.1±2.2(7.7-33IU/L)，患者的初始睪丸體積為6.0±0.6mL。
　　 結論：
　　 (1)約1/3的男性IHH患者可檢測到明確致病基因。CHD7、FGFR1、PROK2和KAL1四個基因突變占全部突變約80％，其中FGFR1突變患者的性腺軸功能損傷最為嚴重。(2)在明確基因突變IHH患者中，23％的患者存在雙（寡）基因突變，77％為單基因突變，兩組患者的生精指數(shù)