蝗蟲黃酮的提取分離和生物活性研究.pdf

1、本文采用比色法測定了不同品種不同產(chǎn)地蝗蟲體內(nèi)黃酮類化合物的含量，并采用正交試驗優(yōu)化出蝗蟲黃酮提取的工藝條件。針對蝗蟲黃酮提取物，采用比色法研究其體外抗氧化能力；利用高脂飼料誘導(dǎo)小鼠高脂血癥模型，研究其降血脂作用；利用老少齡小鼠對照試驗研究了其體內(nèi)抗氧化作用；通過運動小鼠負(fù)重游泳實驗，研究了其抗疲勞作用。結(jié)果表明： 1．采用正交試驗優(yōu)化常規(guī)提取蝗蟲總黃酮的最佳工藝條件為：以脫脂蝗蟲干粉為材料，90％的乙醇為溶劑，1∶30(w/v)

2、的料液比，65℃下提取2小時。在常規(guī)提取基礎(chǔ)上酶法輔助提取的最佳工藝條件是：利用用量為底物1％的復(fù)合酶，在pH=5.0，溫度為45℃的條件下酶解1.0h，然后應(yīng)用常規(guī)方法進(jìn)行提取。 2．不同品種不同產(chǎn)地的蝗蟲體內(nèi)黃酮類化合物的含量具有較大的差異，其中總黃酮含量最高的是陜西長安中華稻蝗，高達(dá)22.61 mg/g，陜西長安短星翅蝗體內(nèi)總黃酮含量最低，為3.79 mg/g；同一品種不同產(chǎn)地的蝗蟲體內(nèi)總黃酮的含量也有差異，如內(nèi)蒙黃脛小車

3、蝗的含量為17.68 mg/g，而陜西長安黃脛小車蝗則為6.00mg/g。 3．中華稻蝗總黃酮酶法輔助提取液的濃縮浸膏依次用氯仿、乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行萃取分離，然后對得率最多的乙酸乙酯萃取部分進(jìn)行了多次柱色譜分離，并通過薄層色譜及顏色反應(yīng)進(jìn)行鑒定，證明得到了3個黃酮類組分。 4．中華稻蝗各黃酮類組分均有較好的總抗氧化能力和較好的還原能力。除正丁醇萃取物的總抗氧化能力在20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、80μ

4、g/mL濃度范圍內(nèi)小于BHT的總抗氧化能力外，其余幾種黃酮類組分均大于BHT的總抗氧化能力，其中水相殘留物的抗氧化能力高達(dá)(223.73±2.86)U/mL。在30μg/mL、60μg/mL、90μg/mL、120μg/mL濃度范圍內(nèi)，還原能力從大到小的順序是：水相殘留物、酶法粗提物、正丁醇萃取物、BHT、乙酸乙酯萃取物。 中華稻蝗各黃酮類組分在各個自由基體系中均有較好的清除自由基的能力，且清除率和濃度成正比例關(guān)系；在3種萃取物

5、中，水相殘留物在各自由基體系中的清除能力均大于BHT，清除羥基自由基的IC<,50>為25.16±0.6μg/mL、清除超氧陰離子自由基的IC<,50>為35.06±0.86μg/mL、DPPH為19.86±1.24μg/mL、脂質(zhì)過氧化為43.75±0.94μg/mL；其他兩種萃取物在不同體系中的清除率與BHT大小關(guān)系不確定。 5．中華稻蝗黃酮提取物能顯著降低高脂血癥小鼠血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽

6、固醇(LDL-C)含量，顯著提高了高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)含量，有降血脂作用。中華稻蝗黃酮提取物還能顯著降低動脈粥樣硬化指數(shù)(Al)，有預(yù)防動脈粥樣硬化的作用。 6．中華稻蝗黃酮提取物三個劑量組均能極顯著降低老齡小鼠血清和組織脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量，高劑量組顯著提高血清和組織中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和過氧化氫酶(CAT)的活性，中高劑量組均能極顯著增強血清和組織中超氧化物歧化酶(SOD)活性。結(jié)果