胡頹子葉總黃酮的提取分離及平喘活性研究.pdf

1、近年來(lái)，自然環(huán)境已成為世界性問(wèn)題，特別是隨著空氣質(zhì)量的下降，呼吸系統(tǒng)疾病如慢性支氣管炎、支氣管哮喘、慢性咳嗽等已經(jīng)成為威脅人類健康的常見(jiàn)疾病。其中，慢性支氣管炎和支氣管哮喘作為呼吸系統(tǒng)的典型疾病，因其病情頑固、慢性難愈，嚴(yán)重影響患者的健康狀態(tài)及日常生活質(zhì)量，故研究與開(kāi)發(fā)有效的治療藥物具有十分重要的意義。
　　胡頹子葉作為一種習(xí)用藥材，藥用歷史悠久，具有平喘、斂肺、止咳等功效，臨床上用于治療哮喘、慢性喘息性氣管炎。為了挖掘胡頹子葉這

2、一藥用資源，明確其組分與藥效之間的關(guān)系，本課題從胡頹子葉化學(xué)成分群出發(fā)，對(duì)其黃酮類成分群進(jìn)行提取分離，并開(kāi)展活性作用機(jī)制研究。
　　第一，建立胡頹子葉黃酮類化合物的含量測(cè)定方法。研究報(bào)道胡頹子葉中黃酮類化合物多且復(fù)雜，不可能一一測(cè)量其單體化合物的含量，因此本文建立了UV-Vis法測(cè)定胡頹子葉總黃酮的含量以及酸水解-HPLC法測(cè)定胡頹子葉中3種黃酮苷元的含量，這兩種方法均簡(jiǎn)便可靠，重復(fù)性好，準(zhǔn)確度高，可作為胡頹子葉中黃酮類成分的含量

3、測(cè)定方法。
　　第二，優(yōu)化胡頹子葉黃酮類成分的提取工藝。在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，采用正交實(shí)驗(yàn)法對(duì)胡頹子葉黃酮類成分的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果確定最優(yōu)的提取條件為：料液比1：30，乙醇濃度70％，提取次數(shù)3次。在此條件下，胡頹子葉總黃酮苷元得率為0.243%，經(jīng)驗(yàn)證該工藝條件穩(wěn)定可靠。
　　第三，柱層析法分離純化胡頹子葉總黃酮。選取在黃酮類化合物純化過(guò)程中5種較為理想的樹(shù)脂填料（聚酰胺、HP-20、HPD-600、NKA-2、D-

4、101），通過(guò)靜態(tài)吸附解吸實(shí)驗(yàn)從中篩選出適合分離總黃酮的最優(yōu)樹(shù)脂填料，結(jié)果聚酰胺及HP-20富集純化胡頹子葉總黃酮的效果最佳。但動(dòng)態(tài)洗脫實(shí)驗(yàn)顯示，單獨(dú)使用兩種樹(shù)脂填料總黃酮的含量達(dá)不到理想效果（95%以上），故聯(lián)合使用兩種樹(shù)脂填料。結(jié)果表明純化純度有所提高，總黃酮的含量達(dá)到了85%左右。為了達(dá)到預(yù)期的目標(biāo)，接著采用中壓柱層析法，用ODS填料進(jìn)一步分離純化，結(jié)果表明總黃酮的含量達(dá)到了96.68%。
　　第四，胡頹子葉黃酮類成分群對(duì)小