一株屎腸球菌的益生特性及安全性研究.pdf

1、益生菌作為一種飼料添加劑，在畜牧業(yè)生產(chǎn)中得到越來(lái)越廣泛的應(yīng)用，其飼喂效果也得到了畜牧從業(yè)者和學(xué)者的廣泛認(rèn)可。但益生菌的益生特性表現(xiàn)出較為明顯的菌株差異，因此要得到益生性能優(yōu)良的益生菌株，就要進(jìn)行大量的篩選工作。實(shí)驗(yàn)室前期分離保存了一株具有高膽鹽耐受特性的益生菌，本課題對(duì)該株益生菌的種屬、益生特性及安全性進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。具體研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下：
　?。?）通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察、生化鑒定及16S rDNA序列比對(duì)分析，確定該菌株為屎腸球菌

2、（Enterococcus faecium），并命名為屎腸球菌SQ-1。
　?。?）對(duì)該株菌開(kāi)展了體外益生特性研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：SQ-1具有較好的耐酸、耐膽鹽、耐高溫、耐消化酶等特性。在pH2.0的條件下培養(yǎng)3h仍有61.93％的存活率；在膽鹽濃度為0.3%的條件下培養(yǎng)3h有90.37%的存活率，膽鹽濃度達(dá)0.6%時(shí)仍有49.7%的存活率；在60℃環(huán)境中處理15min仍有77.66%的存活率；經(jīng)過(guò)1.2%的胰蛋白酶處理3h后有3

3、1.01%的存活率。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該株菌具有較好的抗逆性，且對(duì)高濃度膽鹽的耐受性較為突出。采用碳?xì)浠衔镳ぶz測(cè)該菌的疏水性，結(jié)果表明 SQ-1疏水率為34.53%，具有中等疏水性。在對(duì)沙門氏菌（CVCC3377）和金黃色葡萄球菌（CICC23926）的抑菌實(shí)驗(yàn)中，抑菌圈直徑分別為11mm和13mm，具有中等抑菌作用。
　?。?）進(jìn)行了SQ-1對(duì)小鼠單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能和血清中IgG、IL-2含量影響的研究。碳粒廓清實(shí)驗(yàn)結(jié)果

4、表明，口服1×109cfu/mL的屎腸球菌SQ-1組與對(duì)照組比較，廓清指數(shù)出現(xiàn)顯著性（P<0.05）升高，表明該菌株對(duì)小鼠的吞噬功能具有顯著的增強(qiáng)作用；血清中IgG含量檢測(cè)結(jié)果顯示，口服1×109cfu/mL的屎腸球菌SQ-1組與對(duì)照組相比較， IgG含量有極顯著性（P<0.01）升高；而IL-2含量無(wú)顯著性差異。這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果，說(shuō)明屎腸球菌SQ-1對(duì)小鼠的免疫功能具有增強(qiáng)作用。
　?。?）對(duì)屎腸球菌SQ-1開(kāi)展了安全性研究，實(shí)驗(yàn)包

5、括：對(duì)20種抗生素敏感性檢測(cè)、毒力基因PCR檢測(cè)和小鼠口服屎腸球菌SQ-1后的臟器指數(shù)、血常規(guī)檢測(cè)以及組織切片觀察等?？股孛舾行詫?shí)驗(yàn)結(jié)果表明，屎腸球菌SQ-1對(duì)8種抗生素敏感，其中最具有代表性的萬(wàn)古霉素抑菌圈直徑為19mm；對(duì)常見(jiàn)的六種毒力基因（Asa1、cylA、efaA、esp、gelE、hyl）的PCR檢測(cè)結(jié)果表明，屎腸球菌SQ-1不存在這六種毒力基因。在口服屎腸球菌 SQ-1的安全性研究中，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組相比較，臟器指數(shù)和血常