AFP靶向USPIO分子探針在肝癌特異性MR成像中的價(jià)值.pdf

1、研究背景
　　 肝細(xì)胞肝癌(Hepatocellularcarcinoma，HCC)在全球癌癥病死率中高居第三位。目前影像學(xué)技術(shù)是診斷HCC的主要手段，但在實(shí)際工作中部分病灶由于缺乏典型影像學(xué)表現(xiàn)而難以定性，并且病灶越小影像學(xué)表現(xiàn)越不典型。近年來(lái)，基于特異性對(duì)比劑的分子成像技術(shù)在疾病的定性診斷中表現(xiàn)出良好的潛力。甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein，AFP)是HCC特異性標(biāo)志物，因此AFP可作為HCC高效、特異的成像靶點(diǎn)

2、。利用其相對(duì)應(yīng)的抗體制備分子探針即可實(shí)現(xiàn)HCC的特異性顯像和診斷，有望解決影像學(xué)表現(xiàn)不典型HCC的定性難題，還為AFP明顯升高的隱匿性HCC的顯示提供可能。本研究擬通過(guò)構(gòu)建靶向AFP的超小型超順磁性氧化鐵顆粒（Ultrosmallsuperparamagneticironoxidenanoparticles，USPIO）分子探針，利用細(xì)胞和動(dòng)物模型探討其在HCC特異性分子成像中的價(jià)值。
　　 目的
　　 探討AFP靶向超

3、小型超順磁性氧化鐵分子探針(AFP-USPIO)在肝細(xì)胞肝癌(HCC)的主動(dòng)靶向特異性成像方面的價(jià)值。
　　 方法
　　 表面修飾的USPIO連接抗AFP抗體后構(gòu)建AFP-USPIO靶向分子探針，實(shí)驗(yàn)分為AFP-USPIO組（靶向組）和USPIO組（非靶向組）。將鐵濃度為100ug·ml-1的AFP-USPIO及USPIO，按照150μl、100μl、50μl的劑量分別與HepG2細(xì)胞孵育4h后行體外MR成像(magne

4、ticresonanceimaging，MRI)并測(cè)量T2WI信噪比(signal-noiseratio，SNR)。構(gòu)建原位肝癌動(dòng)物模型并隨機(jī)分為兩組（每組5只），分別于尾靜脈注射AFP-USPIO或USPIO，注射前及注射后1h進(jìn)行MR成像，注射劑量為20umol·kg-1;測(cè)量T2WI肝臟腫瘤與周圍肝組織的對(duì)比噪聲比(contrastnoiseratio，CNR)，計(jì)算增強(qiáng)前后及兩組之間CNR的差異。普魯士藍(lán)鐵染色驗(yàn)證SNR、CNR

5、的變化與細(xì)胞及組織鐵含量的關(guān)系。
　　 結(jié)果
　　 細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)顯示兩組體外MR的SNR均隨AFP-USPIO或USPIO劑量的增加而下降，并在3種劑量之間的差異均具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，當(dāng)同一劑量時(shí)兩組之間的SNR也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。普魯士藍(lán)染色結(jié)果顯示靶向組細(xì)胞內(nèi)鐵顆粒隨劑量的增加而增多，并與SNR呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(P=0.00，r=-0.926)，而非靶向組鐵染色的細(xì)胞數(shù)則明顯降低。在注射AFP-US

6、PIO前后，大鼠肝臟腫瘤的CNR分別為2.05±0.88和0.96±0.31，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.028，t=3.380）;而注射USPIO前后肝臟腫瘤的CNR分別為2.25±1.50和2.57±1.49，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.275，t=1.263）。在靶向與非靶向組之間，腫瘤強(qiáng)化后的CNR差異也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.042，t=3.487）。病理結(jié)果顯示大鼠模型肝臟腫瘤為HCC，并強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)AFP，靶向組腫瘤組織內(nèi)見大量