間-尼索地平對(duì)脂多糖肺損傷保護(hù)作用的研究.pdf

1、間-尼索地平為尼索地平的同分異構(gòu)體,是河北醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院首創(chuàng)合成的一種二氫吡啶類鈣通道阻滯劑。已有實(shí)驗(yàn)證實(shí)鈣拮抗藥維拉帕米可減輕實(shí)驗(yàn)動(dòng)物脂多糖內(nèi)毒素致肺損傷,本實(shí)驗(yàn)擬探討間-尼索地平在肺損傷方面的作用。
　　 急性肺損傷(ALI)是急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)的早期階段,是指由心源性以外各種肺內(nèi)外致病因素引起的急性、進(jìn)行性缺氧性呼吸衰竭,是肺部炎癥和通透性增加的綜合癥,嚴(yán)重威脅著人類的健康。多種病因(包括肺內(nèi)/肺外,感染/非感

2、染)都能直接或間接地引起ALI及ARDS。革蘭陰性細(xì)菌內(nèi)毒素的主要活性成分脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)是導(dǎo)致肺部感染和ALI的主要因素。故本實(shí)驗(yàn)用LPS復(fù)制ALI動(dòng)物模型。
　　 目的:本實(shí)驗(yàn)通過觀察鈣通道阻滯劑間-尼索地平干預(yù)后LPS誘導(dǎo)小鼠急性肺損傷的肺組織病理變化、部分炎癥介質(zhì)的滲出及肺組織毛細(xì)血管通透性的變化,明確間-尼索地平對(duì)LPS誘導(dǎo)小鼠急性肺損傷是否具有保護(hù)作用。
　　 方法:健康

3、昆明種雄性小鼠60只,體重18-22g,隨機(jī)分成6組:
　　 ①對(duì)照組(羧甲基纖維素鈉+生理鹽水,n=10)
　　 ②模型組(羧甲基纖維素鈉+LPS,n=10)
　　 ③間-尼索地平0.5 mg·kg-1治療組(m-Nis+LPS,n=10)
　　 ④間-尼索地平1.0 mg·kg-1治療組(m-Nis+LPS+LPS,n=10)
　　 ⑤間-尼索地平2.0 mg·kg-1治療組(m-Nis+LP

4、S+LPS,n=10)
　　 ⑥維拉帕米20 mg·kg-1治療組(維拉帕米+LPS,n=10)
　　 對(duì)照組和模型組分別用羧甲基纖維素鈉灌胃(0.1 ml·10g-1),間-尼索地平各組分別給與相應(yīng)劑量的間-尼索地平(0.5、1.0、2.0mg·kg-1)灌胃,維拉帕米組給與相應(yīng)劑量的維拉帕米(20mg·kg-1)灌胃,30 min后麻醉小鼠氣管內(nèi)滴注脂多糖內(nèi)毒素4 mg·kg-1。
　　 于滴注脂多糖內(nèi)毒素6

5、h后摘眼球取血用于檢測(cè)血中蛋白含量,開胸行左肺肺泡灌洗檢測(cè)支氣管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中蛋白含量,留取右肺上葉稱重烤干計(jì)算肺濕干比,留取右肺中葉用于病理檢測(cè),其余肺組織用來(lái)測(cè)定MDA含量。
　　 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS13.0 for windows統(tǒng)計(jì)軟件包對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行單因素方差分析,每組數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x)±s)表示。
　　 結(jié)果:1.小鼠肺組織病理變

6、化
　　 氣道內(nèi)滴入LPS6 h后,模型組小鼠肺泡間隔增寬,肺組織間隙有大量的中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)和紅細(xì)胞滲出,可見肺組織水腫,點(diǎn)、片狀出血,間-尼索地平+LPS組與維拉帕米+LPS組肺損傷明顯減輕,肺組織結(jié)構(gòu)均趨于正常,但仍有輕度肺組織水腫及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。
　　 2.各組小鼠肺組織濕重/干重(W/D)值的變化情況
　　 模型組W/D值明顯高于對(duì)照組,差異有顯著意義(P＜0.01),說明肺部水腫明顯。同模型組比較,間-

7、尼索地平0.5 mg·kg-1組肺W/D值低于模型組(P＜0.05),間-尼索地平1.0 mg·kg-1、2.0 mg·kg-1及維拉帕米組肺W/D值明顯低于模型組,差異有非常顯著意義(P＜0.01)。
　　 3.各組小鼠肺組織MDA含量的變化情況
　　 模型組小鼠MDA含量明顯高于對(duì)照組,差異有非常顯著意義(P＜0.01),這說明應(yīng)用LPS后機(jī)體的氧化反應(yīng)增強(qiáng)間-尼索地平1.0 mg·kg-1組肺MDA含量明顯低于模型

8、組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。間-尼索地平2.0 mg·kg-1組和維拉帕米組肺MDA含量明顯低于模型組(P＜0.01)。
　　 4.各組小鼠肺泡灌洗液中蛋白含量的變化情況
　　 模型組小鼠給LPS后肺泡灌洗液中蛋白含量明顯高于對(duì)照組,(P＜0.01)。間-尼索地平1.0 mg·kg-1組肺泡灌洗液中蛋白含量明顯低于模型組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。間-尼索地平2.0 mg·kg-1組肺泡灌洗液中蛋白含量

9、明顯低于模型組,差異有顯著意義(P＜0.01)。維拉帕米組肺泡灌洗液中蛋白含量低于模型組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 5.各組小鼠肺毛細(xì)血管通透指數(shù)的變化情況
　　 模型組小鼠給LPS后肺毛細(xì)血管通透指數(shù)明顯高于對(duì)照組,差異有顯著意義(P＜0.01)。間-尼索地平0.5 mg·kg-1和1.0 mg·kg-1組對(duì)通透指數(shù)的影響不明顯,2.0 mg·kg-1組毛細(xì)血管通透指數(shù)明顯低于模型組,差異有顯著意義(P