慢病毒介導(dǎo)的靶向血管生成素2的siRNA對(duì)人胰腺癌PANC-Ⅰ抑制作用的體外研究.pdf

1、目的：觀察攜帶靶向血管生成素2基因的siRNA的慢病毒對(duì)體外培養(yǎng)的人胰腺癌PANC-1細(xì)胞血管生成及侵襲能力作用的影響。
　　 方法：將LV-Ang2-siRNA轉(zhuǎn)染入人胰腺癌細(xì)胞株P(guān)ANC-1中，以綠色熒光蛋白（GFP）基因?yàn)閳?bào)告基因，用熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀觀察病毒轉(zhuǎn)染效率。用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶連反應(yīng)檢測(cè)PANC-1細(xì)胞Ang2-mRNA和蛋白表達(dá)，MTT法及流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期及凋亡，雞胚及侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)腫瘤血管生成及轉(zhuǎn)移侵襲能

2、力。
　　 結(jié)果：LV-Ang2-siRNA被成功地轉(zhuǎn)染入PANC-1細(xì)胞中，F(xiàn)CM檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率95％以上。與陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)組PANC-1細(xì)胞的Ang2mRNA和蛋白的表達(dá)明顯受到抑制。實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞轉(zhuǎn)移侵襲能力明顯下降且腫瘤血管生成明顯減少，差異有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。三組細(xì)胞的凋亡率均較低，組間差異無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　 結(jié)論：LV對(duì)PANC-1細(xì)胞有較好的轉(zhuǎn)染能力，可介