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文檔簡介
1、目的:觀察攜帶靶向血管生成素2基因的siRNA的慢病毒對體外培養(yǎng)的人胰腺癌PANC-1細(xì)胞血管生成及侵襲能力作用的影響。
方法:將LV-Ang2-siRNA轉(zhuǎn)染入人胰腺癌細(xì)胞株P(guān)ANC-1中,以綠色熒光蛋白(GFP)基因?yàn)閳蟾婊?,用熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀觀察病毒轉(zhuǎn)染效率。用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶連反應(yīng)檢測PANC-1細(xì)胞Ang2-mRNA和蛋白表達(dá),MTT法及流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期及凋亡,雞胚及侵襲實(shí)驗(yàn)檢測腫瘤血管生成及轉(zhuǎn)移侵襲能
2、力。
結(jié)果:LV-Ang2-siRNA被成功地轉(zhuǎn)染入PANC-1細(xì)胞中,F(xiàn)CM檢測轉(zhuǎn)染效率95%以上。與陰性對照組和空白對照組比較,實(shí)驗(yàn)組PANC-1細(xì)胞的Ang2mRNA和蛋白的表達(dá)明顯受到抑制。實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞轉(zhuǎn)移侵襲能力明顯下降且腫瘤血管生成明顯減少,差異有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。三組細(xì)胞的凋亡率均較低,組間差異無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
結(jié)論:LV對PANC-1細(xì)胞有較好的轉(zhuǎn)染能力,可介
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