玉米CMS-C育性恢復(fù)F1特異片段的遺傳分析.pdf

1、玉米C型細(xì)胞質(zhì)雄性不育是近年來研究和利用的重點(diǎn)。目前，實(shí)現(xiàn)C型胞質(zhì)三系配套制種的最大難題是選育強(qiáng)恢復(fù)力的恢復(fù)系。本實(shí)驗(yàn)室前期曾采用150對(duì)SSR引物對(duì)恢保關(guān)系存在差別的測(cè)交F1進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)SSR引物AC204515.3-10在育性保持F1中能擴(kuò)增出一條與雙親擴(kuò)增結(jié)果相同的條帶即單帶，在育性恢復(fù)F1中能擴(kuò)增出2條帶，其中一條與親本相同，另一條為特有條帶，此處稱為雙帶。本研究以3個(gè)F2群體和6個(gè)雙交群體為材料，首先調(diào)查群體育性分離表現(xiàn)，其

2、次用前述引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增檢測(cè)，以分析該特異片段的遺傳及其與育性表現(xiàn)的關(guān)系。所得結(jié)果如下:
　　1.育性調(diào)查結(jié)果顯示，(C48-2×18-599白)F2群體中總株數(shù)為298株，不育株153株，可育株145株，可育∶不育分離比近似為1∶1;(C478×自330)F2群體中總株數(shù)為303株，不育株152株，可育株151株，可育∶不育分離比近似為1∶1;(C48-2×A619)F2群體中總株數(shù)為290株，不育株17株，可育株273株，經(jīng)

3、x2檢驗(yàn)，可育∶不育分離比符合15∶1?；?C48-2×A619)F2群體育性分離比，推斷A619中可能含有兩對(duì)獨(dú)立重疊的恢復(fù)基因。
　　2.雙交群體的育性調(diào)查結(jié)果顯示，[(C478×18-599白)×(C478×自330)]群體中總株數(shù)為297株，可育株119株，不育株178株，可育∶不育分離比接近3∶4;[(C478×18-599白)×(C48-2×18-599白)]群體中總株數(shù)為294株，可育株134株，不育株160株，其

4、育性分離比為可育∶不育近似3∶4;[(C48-2×自330)×(C48-2×18-599白)]群體中總株數(shù)為288株，可育株111株，不育株177株，其育性分離比為可育∶不育近似3∶4;[(C48-2×自330)×(C478×自330)]群體中總株數(shù)為299株，可育株149株，不育株150株，其育性分離比可育∶不育接近1∶1;[(C478×18-599白)×(C48-2×A619)]的總株數(shù)為300株，可育株270株，不育株30株，可育

5、∶不育分離比接近9∶1;雙交群體[(C48-2×自330)×(C48-2×A619)]的總株數(shù)為289株，可育株161株，不育株128株，可育與不育育性分離比接近5∶4。
　　3.對(duì)于3個(gè)F2群體和2個(gè)雙交群體，分別提取單株DNA，F(xiàn)2群體提取約200個(gè)單株，雙交群體提取約100個(gè)單株。利用引物AC204515.3-10對(duì)其進(jìn)行PCR擴(kuò)增檢測(cè)，對(duì)單帶、雙帶數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，并結(jié)合對(duì)每個(gè)單株的育性調(diào)查結(jié)果進(jìn)行分析，(C48-2×18-59

6、9白)F2群體中，單帶為104株，單帶對(duì)應(yīng)的不育株為65株，對(duì)應(yīng)的可育株為39株;雙帶為96株，雙帶對(duì)應(yīng)的不育株為36株，對(duì)應(yīng)的可育株為60株;(C48-2×A619)F2群體中，單帶數(shù)為99株，單帶對(duì)應(yīng)的不育株為4株，對(duì)應(yīng)的可育株為95株;雙帶數(shù)為100株，雙帶對(duì)應(yīng)的不育株為6株，對(duì)應(yīng)的可育株為94株;(C478×自330)F2群體中，單帶數(shù)為123株，單帶對(duì)應(yīng)的不育株為66株，對(duì)應(yīng)的可育株為57株;雙帶數(shù)為76株，雙帶對(duì)應(yīng)的不育株為

7、36株，對(duì)應(yīng)的可育株為40株;(C48-2×自330)×(C48-2×18-599白)群體中，單帶數(shù)為56株，單帶對(duì)應(yīng)的不育株為33株，對(duì)應(yīng)的可育株為23株;雙帶數(shù)為44株，雙帶對(duì)應(yīng)的不育株為28株，對(duì)應(yīng)的可育株為16株;(C48-2×自330)×(C48-2×A619)群體中，單帶數(shù)為55株，單帶對(duì)應(yīng)的不育株為20株，可育株為35株;雙帶數(shù)為45株，雙帶對(duì)應(yīng)的不育株為18株，可育株為27株。
　　4.分析以上5個(gè)群體的單株P(guān)CR

8、擴(kuò)增結(jié)果，發(fā)現(xiàn)有4個(gè)群體即(C48-2×18-599白)F2，(C48-2×A619)F2，[(C48-2×自330)×(C48-2×18-599白)]，[(C48-2×自330)×(C48-2×A619)]中單、雙帶分離比符合1∶1，而(C478×自330)F2群體的單、雙帶分離比不符合1∶1。
　　5.將以上5個(gè)群體的單株P(guān)CR擴(kuò)增檢測(cè)結(jié)果即單帶對(duì)雙帶，與育性調(diào)查結(jié)果即可育對(duì)不育相結(jié)合，通過卡平方法進(jìn)行獨(dú)立性檢驗(yàn)，結(jié)果只在(C