恩度聯(lián)合順鉑不同給藥時序?qū)57-BL6小鼠Lewis肺癌移植瘤的影響.pdf

1、 目的：肺癌是當今世界上最常見的惡性腫瘤之一,盡管抗血管生成治療聯(lián)合細胞毒療法在臨床中取得了較為矚目的療效,但是如何更有效地將這兩類藥物以最佳時序聯(lián)合應用,進一步提高療效,仍是目前抗血管生成的研究方向之一。本研究將重組人血管內(nèi)皮抑素以不同給藥時序聯(lián)合順鉑對Lewis肺癌動物模型進行處理,計算腫瘤體積及抑瘤率,測定腫瘤細胞的細胞周期分布、瘤組織的微血管密度及順鉑濃度,從而闡明恩度聯(lián)合順鉑的最佳給藥時序,并初步探討其可能的機制。方法：本實

2、驗第一部分取35只C57/BL6小鼠,隨機分成5組,每組7只,接種Lewis肺癌細胞建立Lewis肺癌小鼠模型,將瘤塊進行體內(nèi)代3代后得到實驗小鼠,開始藥物干預：生理鹽水組(空白對照組)、恩度組(10 mg/kg/d D1—D14)、順鉑組(4 mg/kg/d D1、D8)、恩度和順鉑同時使用組(恩度10 mg/kg/d D1—D14、順鉑4 mg/kg/d D1、D8)、先恩度后順鉑組(恩度10 mg/kg/d D1—D14、順鉑4

3、mg/kg/d D5、D12),每組均為腹腔注射給藥。觀察小鼠的生長情況,測量小鼠的腫瘤體積,給藥結束24小時后頸椎脫臼法處死小鼠,獲取腫瘤組織,測稱取腫瘤重量,計算抑瘤率及q值,免疫組化檢測MVD,流式細胞檢測瘤細胞周期分布,并計算比較PI值。第二部分取60只C57/BL6小鼠,隨機分成單用順鉑組、恩度與順鉑同時使用組和先恩度4天后順鉑組,每組20只,每組分別于注射順鉑第1天、3天、5天、8天(每組每個時間點5只小鼠)時進行眼眶取血,

4、并處死小鼠,HPLC 檢測血液及瘤組織中 DDP 濃度,免疫組化檢測各組不同各時間點瘤組織 MVD ,比較各組 DDP 濃度及MVD變化有無差異及兩者間關系。結果：1、各組用藥前的瘤體積比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。用藥結束后,順鉑組、同時用藥組、先后用藥組小鼠的瘤體積、瘤重明顯<對照組(P <0.05),其中同時組又明顯<順鉑組、先后組(P <0.05)。先后組的協(xié)同指數(shù)q 值等于1.095,表現(xiàn)為相加效應,而同時組的q 值等

5、于1.564,表現(xiàn)為協(xié)同作用,同時用藥能夠?qū)π∈?Lewis 肺癌移植瘤生長超到更好地抑制作用。2、藥物作用于腫瘤細胞后,細胞周期分布分生了明顯變化。與對照組相比,恩度組、同時組和先后組瘤細胞G0/G1期比例增加,S期比例下降,增殖指數(shù)PI明顯下降(P<0.05)。且同時組與先后組相比 G0/G1 期比例增加、S 期比例下降(P<0.05),增殖指數(shù) PI 下降(P<0.05)。3、恩度組、順鉑組、同時組、先后組的MVD均低于對照組,其

6、中同時組MVD最低,對比恩度組P=0.004,對比先后組P=0.021。先后組與恩度組比較無統(tǒng)計學差異。4、在注射順鉑第三天時,同時組腫瘤組織中DDP濃度已高于血液中DDP濃度,且同時組腫瘤組織中濃度較先后組、順鉑組均高(P<0.05),至第8天再次給藥后,同時組腫瘤組織中DDP濃度最高,達3.794±0.210 μg/ml,但先后組與順鉑組之間無顯著差異。5、在給藥后第 5 天同時組 MVD明顯低于順鉑組(P<0.05)。第8天再次給

7、藥后,先后組、同時組的MVD 均較順鉑組更低(P <0.01),其中同時組最低,同時組對比先后組P =0.047。結論：1、恩度與順鉑同時使用時能更明顯地抑制小鼠 Lewis 肺癌移植瘤的生長,兩者同時使用時具有協(xié)同抗腫瘤的作用,而先恩度后順鉑僅具有相加抗腫瘤的作用。2、順鉑與恩度同時使用可以明顯改善細胞周期分布,使更多腫瘤細胞處于 G0/G1 期,減少S期細胞數(shù)量,降低細胞增殖。3、恩度聯(lián)合順鉑較單藥組能更大程度地降低瘤組織MVD,且