人臍血間質(zhì)干細(xì)胞趨向胃癌種植瘤及其分子機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究人臍血間質(zhì)干細(xì)胞對(duì)胃癌組織的趨向性并探討其分子機(jī)制。 方法：(1)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)形態(tài)學(xué)觀察人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞在裸鼠各組織中的分布：裸鼠腹股溝皮下注射人SGC-7901胃癌細(xì)胞建立胃癌種植瘤模型，熒光染料SP-DiI染色人臍血間質(zhì)干細(xì)胞及成纖維細(xì)胞，分組注射到對(duì)側(cè)腹股溝皮下。10天后處死裸鼠，取出腫瘤、注射部位、肝臟、脾臟和肺臟組織，連續(xù)切片分別制成冰凍切片和常規(guī)HE染色，熒光顯微鏡下觀察冰凍切片中間質(zhì)干細(xì)胞和成纖維細(xì)胞在各器

2、官中的分布。(2)用RT-PCR方法測(cè)定人胃癌細(xì)胞SGC-7901、MGC80-3、人大腸癌細(xì)胞HT-29各種癌細(xì)胞中CXCR4 mRNA表達(dá)，及人臍血間質(zhì)干細(xì)胞SDF-1 mRNA的表達(dá)，探討CXCR4/SDF-1軸在癌細(xì)胞和間質(zhì)干細(xì)胞相互趨化運(yùn)動(dòng)中的作用。(3)用熒光定量PCR及免疫組化方法了解CXCR4/SDF-1軸在人胃癌組織和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移間的作用：取40例臨床手術(shù)切除的胃癌組織、胃正常粘膜及胃周腫大淋巴結(jié)，分別測(cè)定胃癌組織和胃正

3、常粘膜中CXCR4 mRNA及胃周腫大淋巴結(jié)中SDF-1 mRNA的表達(dá)。 結(jié)果：(1)腫瘤組織內(nèi)見到大量紅色染料標(biāo)記的人臍血間質(zhì)干細(xì)胞，注射部位、肝臟、脾臟及肺臟中未發(fā)現(xiàn)間質(zhì)干細(xì)胞存在，紅色熒光物質(zhì)在腫瘤切片中所占得比例與其它部位切片相比有顯著性差異(P<0.05)；成纖維細(xì)胞主要集中于注射部位，其它臟器中未發(fā)現(xiàn)存在；(2)熒光定量PCR結(jié)果顯示胃癌組織中CXCR4-mRNA的表達(dá)(1.624±1.380)明顯強(qiáng)于胃正常粘膜組

4、(1.072±0.524)(P<0.05)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌組織CXCR4-mRNA的表達(dá)(0.823±0.551)強(qiáng)于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌組織(0.392±0.338)(P<0.05)，有胃癌轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)中SDF-1-mRNA的表達(dá)(0.5432±0.4907)明顯強(qiáng)于無胃癌轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)(0.2640±0.2601)(P<0.05)；有胃癌轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)中SDF-1表達(dá)和相應(yīng)胃癌組織中CXCR4的表達(dá)量高度相關(guān)(r=0.776，p<0.

5、01)：(3)免疫組化結(jié)果顯示CXCR4在胃癌中的陽(yáng)性率為70.0％，正常胃粘膜中的陽(yáng)性率為27.5％，兩組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，CXCR4的表達(dá)水平與分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Borrmann分型和臨床分期密切相關(guān)(P<0.05)，與病人的年齡、性別、腫瘤的大小和腫瘤部位無關(guān)(P>0.05)；SDF-1于有胃癌轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中的表達(dá)陽(yáng)性率為75.0％，無胃癌轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)中的陽(yáng)性率為27.5％，兩組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

6、 結(jié)論：(1)人臍血間質(zhì)干細(xì)胞在動(dòng)物體內(nèi)能趨向到胃癌組織中，利用此特性可望將其作為載體應(yīng)用到胃癌的診斷和治療上；(2)癌細(xì)胞表達(dá)CXCR4，間質(zhì)干細(xì)胞和淋巴細(xì)胞表達(dá)SDF-1，符合CXCR4/SDF-1軸中趨化因子SDF-1和其受體CXCR4相互趨化吸引的規(guī)律；(3)CXCR4/SDF-1軸在胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮了重要作用，CXCR4和SDF-1之間的相互吸引作用導(dǎo)致了胃癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，為間質(zhì)干細(xì)胞的趨向運(yùn)動(dòng)分子機(jī)制提供了佐