牡丹芍藥組間遠(yuǎn)緣雜交及‘鳳丹’胚培養(yǎng)研究.pdf

1、本文以芍藥品種‘粉玉奴’（Paeonia lactiflora‘Fenyunu’）為母本，牡丹品種‘鳳丹’（Paeonia suffruticosa‘Fengdan’）為父本，進(jìn)行遠(yuǎn)緣雜交。通過對(duì)其花粉的貯藏和活力測(cè)定以及電鏡掃描，對(duì)比雜交親本花粉貯藏過程中花粉活力變化、花粉形態(tài)差異;試驗(yàn)對(duì)母本‘粉玉奴’開花習(xí)性和柱頭可授期進(jìn)行了觀察統(tǒng)計(jì)，確定了最佳授粉時(shí)期;通過對(duì)人工授粉后柱頭和胚胎的跟蹤觀察，探究了遠(yuǎn)緣雜交不育的原因。對(duì)‘鳳丹’成熟

2、胚培養(yǎng)研究了根長(zhǎng)和不同GA3和6-BA對(duì)胚離體組織培養(yǎng)的影響。研究結(jié)果如下:
　　1.所用父本‘鳳丹’花粉活力在相同的貯藏條件下的不同時(shí)期內(nèi)均高于芍藥母本‘粉玉奴’，雖然隨著貯藏時(shí)間的增加，花粉活力逐漸下降，但是授粉前花粉活力66.03％,符合雜交授粉用花粉標(biāo)準(zhǔn)。電鏡掃描試驗(yàn)結(jié)果表明，親本花粉粒形態(tài)相似，只在表面紋飾上有差異，且父本‘鳳丹’花粉畸形率小于母本‘芍藥’。
　　2.‘粉玉奴’群體花期為4月25日～5月3日，4月2

3、8日進(jìn)入盛花期;松雷-大蕾-開放的過程約需要1～2d，盛花期約4～5d;盛花期的第二天柱頭開始分泌粘液，通過對(duì)柱頭的追蹤觀察，確定第2～6d為柱頭的可授期，開花后第4～5d可授性最強(qiáng)，粘液能夠粘住花粉。
　　3.牡丹與芍藥遠(yuǎn)緣雜交主要存在受精前障礙，‘鳳丹’花粉能夠在芍藥柱頭上粘附并萌發(fā)，但是萌發(fā)時(shí)間滯后，花粉管的生長(zhǎng)受到阻礙，表現(xiàn)出不同形式的畸形，并誘導(dǎo)柱頭產(chǎn)生一系列的胼胝質(zhì)反應(yīng)，最終使花粉管難以穿過花柱進(jìn)入子房完成受精。

4、>　　4.對(duì)胚珠的切片觀察未發(fā)現(xiàn)胚囊內(nèi)有胚生成或胚敗育，未完成雙受精的個(gè)體在授粉14d后與正常自然結(jié)實(shí)的有明顯差別，具體表現(xiàn)為，心皮表面皺縮，色澤暗淡，授粉后早期胚珠就停止增大、皺縮，之后逐漸干癟。試驗(yàn)最終獲得雜交種子49粒，遠(yuǎn)緣雜交結(jié)實(shí)率為1.41％。
　　5.胚的組織培養(yǎng)試驗(yàn)表明根長(zhǎng)4-5cm時(shí)通過添加激素打破上胚軸休眠所需時(shí)間最短，但是最終的胚苗褐化和愈傷較為嚴(yán)重，平衡各項(xiàng)指標(biāo)后認(rèn)為打破上胚軸休眠適宜的根長(zhǎng)為3-4cm的胚苗

5、。不同根長(zhǎng)胚苗可溶性糖含量差異不顯著，隨著根長(zhǎng)度增加，可溶性淀粉含量總體呈下降趨勢(shì)，可溶性蛋白含量呈“下降-上升-下降”的趨勢(shì)。
　　6.無論是單一添加GA3還是同時(shí)添加GA3與6-BA都能打破上胚軸休眠長(zhǎng)出真葉，兩者適宜的配比能夠加速上胚軸休眠解除的速度，并提高成苗率。打破上胚軸休眠所需時(shí)間最短的激素配比為6-BA0.1 mg·L-1+GA31.0mg·L-1，最優(yōu)的配比為6-BA0.5mg·L-1GA31.0mg·L-1。另外