PPARα-γ在犬體外循環(huán)缺血再灌注心肌胰島素抵抗中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：探討過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)α/γ在犬體外循環(huán)缺血再灌注心肌中的表達(dá)和意義。
　　 方法：24條健康雜種犬，隨機(jī)分成對(duì)照組(不阻斷主動(dòng)脈)、模型組、非諾貝特組和羅格列酮組(后三組均阻斷主動(dòng)脈60min)(n=6)。于轉(zhuǎn)流前、開(kāi)放主動(dòng)脈后15min、30min、60min、120min分別取左鎖骨下動(dòng)脈血、冠狀靜脈竇血和左室心尖部心肌組織。放射免疫法測(cè)定血漿胰島素、胰高血糖素；乳酸酶法測(cè)定血漿乳酸濃度；氧化酶法

2、測(cè)定血漿葡萄糖濃度并進(jìn)一步計(jì)算分析心肌的葡萄糖凈攝取量和葡萄糖凈攝取率；氣相色譜法測(cè)定血漿游離脂肪酸濃度；免疫組化SP法以及圖象分析系統(tǒng)檢測(cè)分析PPARα/γ蛋白表達(dá)量的變化；Real Time RT-PCR法檢測(cè)心肌PPARα/γmRNA量的表達(dá)及變化。實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)圍手術(shù)期血流動(dòng)力學(xué)的變化；分析比較各時(shí)間點(diǎn)的與胰島素抵抗(IR)相關(guān)的指標(biāo)的變化。
　　 結(jié)果：1.葡萄糖代謝：體外循環(huán)心肌缺血再灌注后，模型組、非諾貝特組和羅格列酮組

3、的血漿葡萄糖濃度較對(duì)照組和體外循環(huán)轉(zhuǎn)流前均明顯增高(P<0.05或P＜0.01)，與非諾貝特組和羅格列酮組相比較，模型組的血漿葡萄糖濃度增高的程度明顯、持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，恢復(fù)慢(P<0.05或P＜0.01)。心肌葡萄糖凈攝取量及心肌葡萄糖凈攝取率于開(kāi)放主動(dòng)脈后15min時(shí)均明顯降低，開(kāi)放主動(dòng)脈后30～120min模型組、非諾貝特組和羅格列酮組對(duì)葡萄糖的利用雖有不同程度恢復(fù)，但均未能達(dá)到轉(zhuǎn)流前水平。與非諾貝特組和羅格列酮組相比較，模型組的心肌葡

4、萄糖凈攝取量及心肌葡萄糖凈攝取率持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，恢復(fù)慢(P<0.05)。2.胰島素抵抗(IR)相關(guān)指標(biāo)：體外循環(huán)心肌缺血再灌注后，模型組、非諾貝特組和羅格列酮組的血漿胰島素、胰高血糖素、游離脂肪酸、乳酸濃度較對(duì)照組以及體外循環(huán)轉(zhuǎn)流前均明顯增高，開(kāi)放主動(dòng)脈后15min至30min期間達(dá)峰值，此后逐漸降低，至開(kāi)放主動(dòng)脈后120min時(shí)均未恢復(fù)至轉(zhuǎn)流前水平(P<0.05或P<0.01)。與非諾貝特組和羅格列酮組相比較，模型組升高程度明顯、持續(xù)時(shí)間

5、久、恢復(fù)慢(P<0.05或P<0.01)；體外循環(huán)心肌缺血再灌注開(kāi)放主動(dòng)脈后15 min至120 min期間，模型組、非諾貝特組和羅格列酮組的胰島素抵抗指數(shù)較對(duì)照組以及體外循環(huán)轉(zhuǎn)流前均明顯升高，此后雖有不同程度的降低，但均未能恢復(fù)至轉(zhuǎn)流前水平(與對(duì)照組相比較，P<0.01；與轉(zhuǎn)流前相比較，P<0.05或P<0.01)；與非諾貝特組和羅格列酮組相比較，模型組的胰島素抵抗指數(shù)升高明顯，恢復(fù)慢(P<0.01)。3.心肌PPARα/γ蛋白及總m

6、RNA表達(dá)量：體外循環(huán)心肌缺血再灌注后，模型組、非諾貝特組和羅格列酮組的心肌PPARα/γ蛋白及總mRNA表達(dá)較對(duì)照組以及體外循環(huán)轉(zhuǎn)流前均明顯上升，在開(kāi)放主動(dòng)脈后15min時(shí)最明顯(與對(duì)照組相比較，P<0.01；與轉(zhuǎn)流前相比較，P<0.05或P<0.01)。與非諾貝特組和羅格列酮組相比較，再灌注后模型組的心肌PPARα/γ蛋白的表達(dá)量在體外循環(huán)缺血再灌注15min時(shí)表達(dá)量降低，但隨著時(shí)間推移其表達(dá)量和上升幅度漸漸增高；至再灌注120 m

7、in時(shí)，模型組的PPARα/γ蛋白表達(dá)量上升明顯，持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，恢復(fù)慢(P＜0.05或P<0.01)。4.心功能指標(biāo)：體外循環(huán)心肌缺血再灌注15min時(shí)，模型組、非諾貝特組和羅格列酮組的LVSP和±dp/dtmax均明顯降低，LVEDP均明顯升高，此后隨再灌注時(shí)間的延長(zhǎng)雖逐漸恢復(fù)，但均未能達(dá)到轉(zhuǎn)流前水平(P<0.05或P<0.01)；與非諾貝特組和羅格列酮組相比較，模型組的LVSP及±dp/dtmax下降明顯，LVEDP升高顯著，持續(xù)時(shí)間