mTORC2通路在苯丙胺致大鼠紋狀體損傷中的變化.pdf

1、目的：
　　探討mTORC2通路在苯丙胺致大鼠紋狀體損傷的變化。
　　方法：
　　通過給予SD大鼠腹腔注射苯丙胺(2.5mg/kg/d)建立動物模型,將SD大鼠隨機分為空白組、生理鹽水組與苯丙胺處理組,苯丙胺處理組又根據(jù)給藥與取材時間的不同隨機分為苯丙胺1h、1d、7d和14d組(空白組未給予任何處理;生理鹽水組注射等量生理鹽水;苯丙胺1h組給予苯丙胺注射1次,在給藥后1h取材;苯丙胺1d組、7d組和14d組分別給藥1

2、次、7次、14次,每天1次,并于末次給藥后24h內(nèi)取材;而空白組、生理鹽水組與苯丙胺14d組一同取材)。采用Open field方法測試SD大鼠在給藥前、后的自主行為活動,用刻板行為評分方法(GHF-Dodd法)評價大鼠的刻板行為。用透射電鏡觀察大鼠紋狀體部位神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)的損傷狀況;Western blot方法檢測 mTORC2信號在紋狀體的表達;免疫組化方法定位磷酸化的mTORC2在紋狀體神經(jīng)元的表達分布。
　　結(jié)果：

3、　　行為學(xué)結(jié)果自主行為活動測試發(fā)現(xiàn)給予苯丙胺處理后,苯丙胺1d、7d、14d組自主活動的總距離、速度、運動時間與空白組比較增加,具有顯著性差異(p<0.01)。此外,刻板行為評分結(jié)果顯示,苯丙胺7d、14d組與空白組比較刻板行為評分增加,具有顯著性差異(p<0.01)。
　　透射電鏡結(jié)果透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)紋狀體空白組細胞結(jié)構(gòu)清晰,胞核大,線粒體多呈圓形或橢圓形,線粒體膜結(jié)構(gòu)清晰、嵴排列整齊;神經(jīng)纖維結(jié)構(gòu)清楚、完整。生理鹽水組、苯丙胺

4、1d組與空白組比較細胞結(jié)構(gòu)未見明顯差異。而苯丙胺14d組紋狀體細胞結(jié)構(gòu)模糊,核固縮,線粒體腫脹變形、嵴排列紊亂、斷裂;紋狀體神經(jīng)纖維結(jié)構(gòu)扭曲變形、甚至可見斷裂。
　　Western blot結(jié)果在紋狀體部位,P-rictor(S1219)在苯丙胺1d組(p=0.013)、7d組(p=0.021)、14d組(p=0.031)與空白組比較表達減少有統(tǒng)計學(xué)差異;P-AKT(T308)在苯丙胺14d組與空白組比較表達減少,p=0.000,

5、具有顯著性差異。
　　免疫組化結(jié)果在紋狀體部位,P-rictor(S1219)免疫陽性細胞在紋狀體尾殼核(CPU)和腹側(cè)蒼白球(LGP)都有分布;陽性產(chǎn)物主要分布在胞漿中,胞核淡染。P-rictor(S1219)陽性細胞數(shù)在苯丙胺7d組(p=0.006)、14d組（p=0.006)與空白組比較表達減少,具有顯著性差異,與Western blot結(jié)果相一致。
　　結(jié)論：
　　苯丙胺對紋狀體的損傷機制可能與抑制mTORC2