GX-50對淀粉樣蛋白誘導小膠質細胞炎癥反應的影響.pdf

1、小膠質細胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中主要的免疫細胞，在阿爾茲海默癥（Alzheimer’s disease,AD）的發(fā)生發(fā)展過程中起著非常重要的作用。淀粉樣蛋白沉積形成的老年斑是AD特征性病理表現(xiàn)之一，其主要成分β-淀粉樣蛋白（β-amyloid,Aβ）可以激活小膠質細胞，激活后的小膠質細胞可吞噬和清除Aβ或Aβ-Aβ受體復合物，降低Aβ對神經(jīng)元的損傷，同時也可以釋放出大量的炎性介質等毒性物質，從而引起神經(jīng)元損傷，促進AD的發(fā)展。隨著對小膠質細胞

2、參與AD發(fā)生發(fā)展過程的深入認識，以小膠質細胞為靶標，針對抑制其激活以及炎性因子的產(chǎn)生，或在細胞表面受體中尋找新靶點以提高清除Aβ能力的研究已成為AD防治藥物開發(fā)領域的熱點。
　　研究目的：
　　GX-50是從花椒中提取的一種有效成分，通過藥物軟件分析發(fā)現(xiàn)其結構能夠激活α7煙堿型乙酰膽堿受體。我們的前期實驗探討了GX-50對淀粉樣蛋白誘導的大鼠皮質神經(jīng)細胞損傷的影響，發(fā)現(xiàn)GX-50能夠和大鼠皮質神經(jīng)細胞表面的α7煙堿型乙酰膽堿

3、受體結合,有效抑制Aβ誘導的皮質神經(jīng)細胞凋亡,并能夠抑制LPS誘導的巨噬細胞釋放炎性因子。本研究目的是探討GX-50對Aβ誘導的大鼠小膠質細胞炎癥反應的影響。
　　研究方法：
　　根據(jù)配體和其受體結合親和力的大小，我們選用了不同濃度的Aβ和GX-50處理大鼠原代培養(yǎng)的小膠質細胞，MTT和LDH法檢測其對細胞活性的影響。用受體結合競爭性結合實驗檢測GX-50與小膠質細胞表面α7煙堿型乙酰膽堿受體的結合能力。用酶聯(lián)免疫吸附試驗和

4、細胞因子蛋白芯片檢測GX-50預處理后對淀粉樣蛋白誘導小膠質細胞分泌炎性因子的影響。
　　結果：
　　MTT和LDH檢測的結果顯示1×10-8～10-4M的GX-50,10～50μM的Aβ對小膠質細胞的活性沒有顯著影響。并且GX-50可以競爭性地與小膠質細胞表面的α7煙堿型乙酰膽堿受體結合。根據(jù)使α7煙堿型乙酰膽堿受體激動劑尼古丁和其受體達到最大親和力時的最低濃度，我們選取了1×10-6M的GX-50預處理胞，然后再加入Aβ