血小板衍生生長(zhǎng)因子C在大鼠下腔靜脈血栓溶解過程中的表達(dá)及其意義.pdf

1、背景:DVT是血管外科的常見疾病，其發(fā)生率有逐漸增高的趨勢(shì)，但目前藥物和手術(shù)治療均存在諸多限制，而血栓的自然溶解過程又異常緩慢，導(dǎo)致PTS的發(fā)生率居高不下，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，也給社會(huì)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，因此臨床迫切需要更高效而快速的促進(jìn)血栓溶解、機(jī)化和再通的治療手段。
　　目前已證實(shí)新生血管形成是血栓機(jī)化再通的的關(guān)鍵步驟。靜脈血栓中的新生血管形成比動(dòng)脈血栓更為廣泛。大量研究發(fā)現(xiàn)很多促進(jìn)血管新生因子，比如VEGF、bFGF、

2、HGF、EGF等均能參與血管新生的過程。PDGF-C是PDGF/VEGF家族新近發(fā)現(xiàn)的生長(zhǎng)因子，其活化形式為PDGF-CC，具有強(qiáng)烈的促血管新生能力，是病理性新生血管形成的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因素，且作用靶點(diǎn)比較廣泛，其促進(jìn)血管新生作用可能不依賴于VEGF。目前PDGF-CC是否參與了靜脈血栓的溶解尚不清楚，本實(shí)驗(yàn)主要探討了大鼠靜脈血栓溶解過程中PDGF-CC的表達(dá)情況及其意義，以及PDGF-CC促進(jìn)血栓溶解的作用，旨在為VTE的臨床治療提供新的理

3、論基礎(chǔ)。
　　第一部分、大鼠下腔靜脈血栓模型的建立及靜脈血栓自然溶解過程的研究
　　目的:建立與改進(jìn)大鼠下腔靜脈血栓模型，并且研究靜脈血栓自然溶解過程。
　　方法:將雄性SD大鼠隨機(jī)分為4組，其中實(shí)驗(yàn)組A、B、C組各12只，對(duì)照組D組6只，A組為新型模型建立方法，分別將左腎靜脈平面以下下腔靜脈所有靜脈屬支結(jié)扎，在左腎靜脈平片以下將下腔靜脈縮窄至80％-90％以上，再予以神經(jīng)生物夾刺激靜脈壁使血管內(nèi)皮損傷;B組同A組，但

4、不結(jié)扎靜脈屬支，C組同A組，但不損傷下腔靜脈壁;D組為假手術(shù)組;比較各組術(shù)后24小時(shí)所產(chǎn)生血栓重量，取A組術(shù)后第1、3、7、14、21、28天，并行HE染色及大鼠下腔靜脈造影，觀察靜脈血栓的自然溶解過程。
　　結(jié)果:所有大鼠體重均無明顯差異，實(shí)驗(yàn)組均產(chǎn)生血栓，假手術(shù)組未產(chǎn)生血栓，下腔靜脈造影及組織病理切片均證實(shí)實(shí)驗(yàn)組產(chǎn)生血栓，其病理學(xué)形態(tài)與自然產(chǎn)生血栓的病理學(xué)形態(tài)相似，且通過血栓重量比較，A組血栓重量明顯高于B組、C組，D組則未產(chǎn)

5、生血栓，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，通過血栓切片及大鼠下腔靜脈造影動(dòng)態(tài)觀察大鼠下腔靜脈血栓的自然溶解過程，大鼠下腔靜脈自然溶解過程相對(duì)人類血栓自然溶解較快，約3-4周基本完全溶解。
　　結(jié)論:以結(jié)扎大鼠下腔靜脈建立并改進(jìn)的靜脈血栓模型相對(duì)來說與人類種系近似，易于管理，成功率高，可重復(fù)性高，可以作為建立深靜脈血栓模型的首選方法，對(duì)于大鼠下腔靜脈血栓溶解的自然過程為后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究對(duì)照提供了理論依據(jù)，為血栓栓塞性疾病的研究奠定良好的基礎(chǔ)。
　

6、　第二部分、血小板衍生生長(zhǎng)因子C在大鼠靜脈血栓溶解過程中的表達(dá)及其意義
　　目的:探討靜脈血栓溶解過程中血小板衍生生長(zhǎng)因子CC的表達(dá)情況及其意義。
　　方法:取健康成年雄性SD大鼠建立下腔靜脈血栓模型，設(shè)對(duì)照組及血栓組，分別在術(shù)后1、3、7、14、21、28d下腔靜脈壁及血栓標(biāo)本(n=12)。應(yīng)用Western blotting及RT-qPCR技術(shù)分別檢測(cè)血栓自然溶解過程中大鼠下腔靜脈壁及血栓內(nèi)PDGF-CC蛋白及mRNA的

7、表達(dá);取術(shù)后7d大鼠下腔靜脈血管壁及血栓標(biāo)本(n=3)，用于病理組織形態(tài)學(xué)及PDGF-CC免疫組化觀察。
　　結(jié)果:Western blotting檢測(cè)顯示，術(shù)后1～28d大鼠下腔靜脈血栓中均有PDGF-CC蛋白表達(dá)，以術(shù)后7d表達(dá)量最高(P＜0.05)，大鼠下腔靜脈血管壁中同樣有PDGF-CC蛋白表達(dá)，但各組表達(dá)量較低，組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);RT-qPCR檢測(cè)顯示，術(shù)后1～28d大鼠下腔靜脈血栓中均有PDGF-C

8、C mRNA表達(dá)(P＜0.05)，其中術(shù)后7d相對(duì)表達(dá)量最高，為對(duì)照組的77.71倍，各組大鼠下腔靜脈血管壁中同樣有PDGF-CC mRNA表達(dá)，但各組PDGF-CC mRNA表達(dá)量較低，組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);免疫組化染色顯示術(shù)后7d的血栓標(biāo)本中，新生血管周圍有PDGF-CC的特異性表達(dá)。
　　結(jié)論:PDGF-CC在大鼠下腔靜脈血栓自然溶解過程中呈較高水平表達(dá)，且在血栓中的新生血管周圍有特異性表達(dá)，提示其在血栓溶解