糖脂代謝與維生素D營養(yǎng)狀況相關(guān)性的兒童青少年人群研究及動物研究.pdf

1、本文從以下四方面進行了議論：
　　第一部分 兒童青少年糖脂代謝流行病學調(diào)查及預(yù)測代謝異常人體學測量指標截斷值
　　目的：調(diào)查上海市9-15歲兒童青少年糖脂代謝指標，分析超重肥胖兒童糖脂代謝改變狀況，制定預(yù)測青少年血脂異常的體質(zhì)指數(shù)(body mass index, BMI)最佳截斷值。
　　方法：分層整群隨機抽取上海15所中小學五年級-初中三年級9-15歲青少年，分批召集至復(fù)旦大學附屬兒科醫(yī)院兒童保健科進行體格測量、肥

2、胖程度評估、糖脂代謝指標檢測及肝臟B超檢查。數(shù)據(jù)以Epidata3.1錄入，使用SPSS19.0軟件分析數(shù)據(jù)，并繪制受試者工作特征曲線，以Youden指數(shù)最大數(shù)值所對應(yīng)BMI-SDS/BMI作為最佳截斷值。
　　結(jié)果：初步篩查10，423名青少年，其中1，320名(12.66％)為超重兒童，699名(6.71％)為肥胖兒童，8，404名為正常體重兒童。共538名青少年參加了體檢，其中283名為正常體重兒、115名為超重兒、140名

3、為肥胖兒?？崭挂葝u素、C肽組間差異具有統(tǒng)計學意義。肥胖組總膽固醇高于正常體重組。超重組空腹血糖平均值顯著高于正常體重組。男性青少年總膽固醇、TG、LDL、血糖隨BMI百分位上升而上升，HDL則下降;而女性青少年中無明顯趨勢變化，隨著BMI的增加，僅見HDL降低和TG上升。在男性青少年中，預(yù)測血脂異常的最佳體質(zhì)指數(shù)標準差積分截斷值為1.22，BMI截斷值為21.67kg/m2.
　　結(jié)論：超重和肥胖青少年胰島素敏感性降低，伴隨血脂異

4、常。在男性青少年中，當BMI-SDS升高至1.22以上或BMI升高至21.67 kg/m2以上時，血脂異常風險增加。
　　第二部分：兒童青少年維生素D營養(yǎng)狀況調(diào)查及其與糖脂代謝相關(guān)性研究
　　目的：調(diào)查上海市青少年維生素D營養(yǎng)狀況，通過運動、飲食調(diào)查問卷，體格檢查及糖脂代謝指標檢測，分析維生素D與運動、飲食、體重及糖脂代謝指標相關(guān)性。
　　方法：將第一部分調(diào)查的人群中具有完整運動飲食調(diào)查問卷、足夠血清樣本量進行25-羥

5、維生素D檢測的人群441名納入本研究。凍存于-80℃的血清標本融解后充分搖勻，以電化學發(fā)光法檢測25(OH)D。按性別分層比較不同25(OH)D水平人群的糖脂代謝指標，探討維生素D與各糖脂代謝指標之間的相關(guān)性。
　　結(jié)果：共納入研究對象441名，其中男性284名，女性157名;體檢月份處于冬季者為338名，夏季者為103名。人群平均25(OH)D水平為21.93±8.11 ng/ml，男性青少年平均水平顯著高于女性青少年的水平。研

6、究人群總體維生素D缺乏率為42.40％，其中2.95％為嚴重缺乏;女性維生素D缺乏率顯著高于男性缺乏率。冬季體檢者25(OH)D平均值顯著低于夏季平均值。性別、年齡、BMI-SDS、WC-SDS、季節(jié)、脂肪肝患病情況(p=0.018)、牛奶攝入頻率(p=0.033)在維生素D充足組、不足組、缺乏組間存在統(tǒng)計學差異。酸奶、蛋類、鐵劑、鈣劑及維生素補充劑攝入頻率在組間無統(tǒng)計學差異。將以上組間有統(tǒng)計學差異的變量納入logistic回歸，女性、

7、大年齡和冬季是維生素D缺乏的高危因素。在男性中，25(OH)D與BMI呈負相關(guān)，與腰圍和脂肪肝也呈負相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為-0.320、-0.185，與HDL呈正相關(guān)r=0.293。在女性青少年中未發(fā)現(xiàn)該類相關(guān)性。
　　結(jié)論：青少年維生素D營養(yǎng)狀況欠佳，近一半青少年為維生素D缺乏，尤以女性嚴重。女性、年齡增加和冬季是維生素D缺乏的高危因素。在男性青少年中，維生素D營養(yǎng)狀況與BMI、腰圍及脂肪肝呈負相關(guān)，與HDL呈正相關(guān)。
　　

8、第三部分 肥胖SD大鼠糖脂代謝指標及維生素D3干預(yù)效果研究
　　目的：通過高脂飼料喂養(yǎng)建立飲食誘導肥胖SD大鼠模型，分析肥胖大鼠(DIO)、對照組大鼠及肥胖抵抗(DIO-R)大鼠間糖脂代謝指標及血清25(OH)D水平。以不同劑量維生素D3灌胃探究其對體重、脂肪、血脂、血糖及胰島素等的影響。
　　方法：80只4周齡雄性SD大鼠以高脂肪、高熱量飼料喂養(yǎng)，10只大鼠以普通飼料喂養(yǎng)作為對照組，8周后體重高于對照組平均體重20％以上者

9、為肥胖，未達到該指標者為肥胖抵抗大鼠。對照組大鼠、肥胖抵抗大鼠及肥胖大鼠各10只，禁食12小時后以10％水合氯醛腹腔注射麻醉，測量體重及體長，心腔取血分離血清，剝離兩側(cè)腎周及睪丸周圍脂肪稱重。血清以全自動生化儀檢測TC、TG、HDL、LDL、血糖，以Elisa試劑盒檢測胰島素。將40只肥胖大鼠隨機分為4組，分別以維生素D3250IU/kg.d、500IU/kg.d、1000IU/kg.d灌胃干預(yù)4周，對照組以橄欖油灌胃。干預(yù)完成后，禁食

10、并測量、取血等。以SPSS19.0統(tǒng)計分析對照組、肥胖抵抗組及肥胖組間體重、Lee's指數(shù)、脂肪重量及糖脂代謝指標的差異;以配對t檢驗分析干預(yù)前后體重、代謝指標等變化，不同劑量干預(yù)組間各指標比較采用單因素方差分析，并進行兩兩比較。
　　結(jié)果：造模組與對照組喂養(yǎng)8周后，肥胖組平均體重、脂肪重量、Lee's指數(shù)均顯著高于對照組。肥胖抵抗組平均體重385.70±29.30g，脂肪重量，Lee's指數(shù)，均低于肥胖組，與對照組比較無統(tǒng)計學差

11、異。糖脂代謝方面，三組間TG、胰島素、HDL未見統(tǒng)計學差異;肥胖組TC、Glu、LDL均高于對照組。肥胖抵抗組各指標均與肥胖組接近，且高于對照組。經(jīng)線性回歸分析，血糖與體重及Lee's指數(shù)呈正相關(guān)。高脂飼料喂養(yǎng)的肥胖組與肥胖抵抗組血清25(OH)D均值顯著高于普通飼料喂養(yǎng)的對照組。
　　維生素D3干預(yù)試驗中，250IU/kg·d及500IU/kg·d干預(yù)組在干預(yù)1周后平均體重呈下降趨勢，其中500IU/kg·d組在干預(yù)2周后平均體

12、重低于1000IU/kg·d組(458.10±12.16gvs.471.90±16.04g，p=0.044)，干預(yù)3周后，平均體重顯著低于對照組(446.00±24.53gvs.474.20±18.38g，p=0.009)，干預(yù)4周后，四組間體重差異無統(tǒng)計學意義。四組間干預(yù)前和干預(yù)后TC、TG、LDL、Glu、25(OH)D均無統(tǒng)計學差異;500IU/kg·d組、1000IU/kg·d組及對照組干預(yù)后HDL水平顯著高于250IU/kg·

13、d組;500IU/kg·d組干預(yù)后胰島素平均濃度低于250IU/kg·d組(p＜0.05)，與另兩組無統(tǒng)計學差異。配對t檢驗分析結(jié)果顯示，250IU/kg.d干預(yù)后，TG、HDL較干預(yù)前降低，而血糖及胰島素升高;500IU/kg.d干預(yù)后，TC、TG較干預(yù)前降低，血糖升高;1000IU/kg.d干預(yù)組血糖升高;對照組，TC、TG、HDL均降低，血糖升高。
　　維生素D3干預(yù)組在干預(yù)后血清25(OH)D水平顯著升高，250IU/kg

14、·d組為47.70±4.92ng/ml，5001U/kg·d組為56.54±7.89ng/ml，10001U/kg·d組為68.24±3.50ng/ml，三組間差異有統(tǒng)計學意義;橄欖油對照組干預(yù)前25(OH)D為28.40±1.64ng/ml，干預(yù)后為22.89±3.11 ng/ml，呈顯著降低。
　　結(jié)論：高脂飲食可誘發(fā)雄性SD大鼠肥胖并伴有內(nèi)臟脂肪增加、血脂異常及血糖升高;高脂飲食即使未誘發(fā)肥胖，其糖脂代謝指標亦趨向于肥胖狀態(tài)

15、。500IU/kg·d維生素D3干預(yù)具有良好的血脂調(diào)節(jié)作用;補充維生素D3可有效提高血清25(OH)D水平。
　　第四部分 肥胖SD大鼠肝臟維生素D羥化酶CYP27A1表達研究
　　目的：研究SD大鼠經(jīng)高脂飼料誘導肥胖后其肝臟的脂肪變性情況，及維生素D3羥化酶CYP27A1表達量，探索兩者相關(guān)性。
　　方法：標本為第三部分實驗中高脂飼料喂養(yǎng)的DIO大鼠及對照組大鼠肝臟病理切片及冰凍組織，通過HE染色評估肝細胞脂肪變性程

16、度，以NAFLD組織學評分系統(tǒng)評價脂肪變性程度;以免疫組化染色檢測CYP27A1在肝臟中的表達量，運用Image-pro plus軟件分析表達密度。通過冰凍組織提取蛋白，以Western blot檢測肝臟組織中CYP27A1，以Quantity-One軟件分析其表達量。以SPSS19.0統(tǒng)計分析DIO大鼠、對照組大鼠CYP27A1表達的組間差別，分析其表達量與肝臟脂肪變性的相關(guān)性。
　　結(jié)果：對照組SD大鼠肝臟脂肪變性評分5例為1

17、分，5例為2分;DIO組SD大鼠肝臟脂肪變性評分1例為1分，9例為3分，兩組間具有統(tǒng)計學差異;免疫組化染色結(jié)果顯示，CYP27A1表達主要集中于肝小葉中央，對照組表達顯著高于DIO組; Western blot實驗中，對照組CYP27A1相對表達量為2.08±0.37，顯著高于DIO組，且CYP27A1表達量與脂肪變性評分呈負相關(guān)。
　　結(jié)論：肥胖SD大鼠肝臟脂肪變性較嚴重，維生素D羥化酶CYP27A1表達減少，表達量與肝臟脂肪變