GFP基因修飾的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)合PLGA的形態(tài)學(xué)觀察.pdf

1、目的：觀察綠熒光蛋白(GFP)基因修飾的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(rMSCs)與聚丙交酯-乙交酯(PLGA)膜材料復(fù)合培養(yǎng)，及堿性成纖維生長(zhǎng)因子(bFGF)-綠熒光蛋白(GFP)基因修飾的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與PLGA支架材料復(fù)合培養(yǎng)，為后續(xù)種子細(xì)胞-基因-支架材料-神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子復(fù)合方法構(gòu)建組織工程化脊髓修復(fù)脊髓損傷的可行性提供依據(jù)。
　　 方法：GFP過(guò)表達(dá)慢病毒載體(lv-GFP)轉(zhuǎn)染的rMSCs-GFP按8000細(xì)胞/cm2與

2、PLGA膜材料復(fù)合培養(yǎng)為實(shí)驗(yàn)組，對(duì)照組為普通的培養(yǎng)板上的rMSC-GFP，熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特性，四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT法)測(cè)定兩組細(xì)胞每天的生長(zhǎng)增殖情況；流式細(xì)胞儀測(cè)定PLGA膜材料上第3天rMSCs-GFP的細(xì)胞周期，及用異硫氰酸熒光素(FITC)標(biāo)記的抗體CD34、CD90和用PE標(biāo)記的抗CD44、CD106、CD45、CD11b對(duì)在膜材料上培養(yǎng)的第3天rMSCs-GFP進(jìn)行流式細(xì)胞鑒定。轉(zhuǎn)染的rMSCs-GFP-

3、bFGF及rMSCs-GFP分別以1.0×105/mL接種于PLGA支架材料復(fù)合培養(yǎng)，熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞與支架材料的的復(fù)合培養(yǎng)情況。
　　 結(jié)果：rMSCs-GFP在PLGA膜上貼壁生長(zhǎng)，絕大多數(shù)rMSCs可見(jiàn)綠色熒光，為成纖維細(xì)胞樣形態(tài)，散在分布，3d時(shí)細(xì)胞增多，開(kāi)始變?yōu)槎嘟切危? d時(shí)細(xì)胞基本鋪滿膜，多為多角形和短梭形，與普通培養(yǎng)板上細(xì)胞相似，細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖在PLGA膜上與培養(yǎng)板上大致相同，細(xì)胞周期也大致相同，細(xì)胞在PLG