美法侖—羧甲基殼聚糖高分子前藥的制備與性能研究.pdf

1、近些年來(lái)，惡性腫瘤日益成為危害人類健康的主要疾病之一。隨著醫(yī)藥學(xué)界不斷的努力和研究，許多抗腫瘤藥物被研發(fā)出來(lái)，在維護(hù)人類健康、挽救人類生命中發(fā)揮著重要的作用。美法侖(Melphalan，Mel)是一種氨基酸氮芥類抗腫瘤藥，可用與治療多種腫瘤疾病，包括多發(fā)性骨髓瘤、惡性淋巴瘤、乳腺癌、卵巢癌、慢性白血病以及甲狀腺癌等。還可動(dòng)脈灌注用于治療惡性黑色素瘤、骨肉瘤及軟組織肉瘤等肢體惡性腫瘤。其應(yīng)用廣泛、效果肯定。但其由于選擇性差、半衰期短、水溶

2、性差、生物利用率低，使其在臨床應(yīng)用中存在著一定的缺陷。為解決這些問題，本文選用O-羧甲基殼聚糖(O-carboxymethyl chitosan，OCMC)作為藥物載體，以氨基酸(amino acid，AA)作為連接臂與抗腫瘤藥物美法侖結(jié)合制備了一種新型的水溶性Mel-AA-OCMC高分子前藥。本課題主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)論如下:
　　 (1)以殼聚糖為原料，制備了水溶性較好的O-羧甲基殼聚糖，并以O(shè)CMC為高分子載體，以四種不同的氨

3、基酸（甘氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸和脯氨酸）為連接臂，與Mel進(jìn)行化學(xué)鍵合，形成Mel-AA-OCMC高分子前藥，通過調(diào)節(jié)反應(yīng)投料比，制備不同藥物含量的的產(chǎn)物。所有中間產(chǎn)物和終產(chǎn)物均利用核磁共振（NMR)和紅外光譜(FT-IR)進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征，證明Mel通過連接臂成功接枝到OCMC高分子載體上。用紫外分光光度法測(cè)定不同前藥的載藥量為8.6％～15.9％。不同氨基酸連接臂以及不同的投料比對(duì)載藥量有一定的影響，以Gly為連接臂的前藥的載藥量最大，

4、而以具有較大側(cè)鏈基團(tuán)的氨基酸，如苯丙氨酸、亮氨酸和脯氨酸為連接臂的前藥載藥量則有一定程度的減少。與Mel相比，高分子前藥的水溶性提高了約200倍。含有氨基酸連接臂的前藥與不含連接臂的前藥相比，水溶性也有一定程度的提高。
　　 (2)考察了不同Mel-AA-OCMC高分子前藥的體外釋放性能，研究了前藥在不同pH磷酸鹽緩沖液(PBS)、血漿以及酶溶液中Mel的釋放特性。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，Mel-AA-OCMC高分子前藥在不同pH的PBS緩沖

5、液和血漿中相對(duì)穩(wěn)定，釋放率不超過6％，且在較低pH值條件下，藥物釋放較快。而在溶酶體酶和木瓜蛋白酶溶液中，該高分子前藥能夠迅速釋放，釋放速率依次為Mel-Gly-OCMC＞Mel-Pro-OCMC＞Mel-Phe-OCMC＞Mel-Leu-OCMC＞Mel-OCMC，釋放率最高可達(dá)76％。這些結(jié)果說明，本課題制備的高分子前藥具有很好的血漿穩(wěn)定性，而在腫瘤細(xì)胞內(nèi)酶的作用下，能夠迅速釋放藥物從而達(dá)到治療效果。
　　 (3)用MTT法

6、考察Mel-AA-OCMC高分子前藥對(duì)體外培養(yǎng)RPMI8226腫瘤細(xì)胞的抑制作用，從而初步考察前藥的體外抗腫瘤活性。研究不同濃度的Mel-AA-OCMC高分子前藥和Mel對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制作用。結(jié)果顯示，Mel-AA-OCMC高分子前藥對(duì)RPMI8226腫瘤細(xì)胞的最大抑制率約為相同濃度Mel的52～70％。藥物濃度越高，對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制作用越大;含有氨基酸連接臂的高分子前藥對(duì)RPMI8226腫瘤細(xì)胞的抑制作用明顯大于不含連接臂的前藥，且不