臍帶血巨核系祖細(xì)胞注射液有效性臨床試驗(yàn)研究.pdf

1、一、研究背景
　　近年來,我國血源短缺的問題日益嚴(yán)重,當(dāng)前我國獻(xiàn)血量僅為0.84％,遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于世界高收入國家的4.54%和中等收入國家的1.01%,并且臨床用血需求以每年10-15%的速度快速增長,而采血量的增幅,以北京、天津?yàn)槔?僅為2.9%和6.5%。血液供與求之間巨大的差距,造成我國多個(gè)城市用血極度緊張,從而大大影響急重癥患者的臨床治療。在軍事醫(yī)學(xué)方面,血液保障也占有舉足輕重的作用?，F(xiàn)代戰(zhàn)爭是在核武器威脅下的以高技術(shù)兵器為主的

2、戰(zhàn)爭,核武器、化學(xué)或者生物武器損傷成為戰(zhàn)斗減員的重要因素之一。其中核化生武器所造成的骨髓損傷抑制及其并發(fā)的血小板減少和貧血危害巨大。因此,亟待尋找一種合適有效的“人工血液”替代一部分臨床用血,不僅可以緩解臨床輸血的壓力,而且對戰(zhàn)時(shí)血液保障提供了技術(shù)支持與儲(chǔ)備,具有重要的社會(huì)價(jià)值與戰(zhàn)略意義。
　　眾所周知,造血干細(xì)胞具有自我更新與多向分化潛能的優(yōu)勢,已成功地應(yīng)用于惡性腫瘤、各種血液性疾病等的支持治療和免疫治療。我室前期的研究結(jié)果表明

3、,臍帶血含有豐富的造血干/祖細(xì)胞,其增殖能力強(qiáng),分裂期細(xì)胞多,在適宜的擴(kuò)增時(shí)間及合理的細(xì)胞因子組合下,可以在擴(kuò)增造血細(xì)胞的同時(shí)定向誘導(dǎo)其分化,產(chǎn)生大量功能細(xì)胞,如巨核系祖細(xì)胞、紅系祖細(xì)胞、粒系細(xì)胞等,以及分化終末期的血小板、紅細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、NK細(xì)胞等。根據(jù)上述研究基礎(chǔ),我室研發(fā)出兩種新的臍帶血造血細(xì)胞產(chǎn)品---“臍帶血紅系祖細(xì)胞注射液”和“臍帶血巨核系祖細(xì)胞注射液”,均獲得國家食品藥品監(jiān)督管理局(SFDA)臨床試驗(yàn)批文。如果通過這兩

4、種細(xì)胞產(chǎn)品的臨床試驗(yàn),證實(shí)其安全性及有效性,并獲得臨床使用許可,這將是輸血治療以及造血支持治療中的一次重要的技術(shù)突破。
　　那么選擇什么樣的疾病作為臨床試驗(yàn)的適應(yīng)癥來證實(shí)我們研發(fā)的細(xì)胞產(chǎn)品的生物安全性與治療有效性呢?惡性腫瘤是嚴(yán)重威脅人們生命健康的一類重大疾病。放化療是惡性腫瘤的主要治療方法,然而卻可導(dǎo)致嚴(yán)重的造血損傷,從而引起紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板的產(chǎn)生減少、破壞加重,表現(xiàn)為貧血、出血、感染等,嚴(yán)重者可致死亡。特別是惡性血液病患

5、者,不僅普通的放化療可以導(dǎo)致造血損傷,而且造血干細(xì)胞移植(HSCT)的預(yù)處理治療、移植物抗宿主病(GVHD)將進(jìn)一步加重造血損傷。目前臨床上已用重組的紅細(xì)胞生成素(EPO)、粒/單細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF/GM-CSF)來改善由于化療引發(fā)的貧血和粒細(xì)胞減少,然而目前還沒有一種能夠有效改善放化療后血細(xì)胞減少的藥物。另一種最常用的治療方式是輸注血小板與紅細(xì)胞,這種治療方式對于防止患者自發(fā)性出血以及改善患者貧血癥狀,保證抗癌藥物、化療藥物

6、按規(guī)定的療程用完起到重要的輔助治療作用。據(jù)統(tǒng)計(jì),美國每年為緩解化療后引起的血細(xì)胞減少消耗的血液量約200萬單位,中國每年用血量超過1500萬單位。然而,血液供應(yīng)的缺口嚴(yán)重影響這些患者的治療。此外,反復(fù)輸注血小板面臨血小板輸注無效,反復(fù)輸注紅細(xì)胞可致含鐵血黃素沉著,引起繼發(fā)性血色病,導(dǎo)致肝硬化、心力衰竭、糖尿病、性腺功能障礙等一系列輸血并發(fā)癥,同時(shí)也不可避免地增加了血源性感染及輸血反應(yīng)發(fā)生的概率。
　　面對上述惡性腫瘤放化療后血細(xì)胞

7、減少癥的治療現(xiàn)狀,我們根據(jù)臍帶血來源的血細(xì)胞產(chǎn)品制備周期、保存時(shí)效等特點(diǎn),通過與多家臨床單位的反復(fù)咨詢溝通,選擇了這種定期或擇機(jī)擇時(shí)進(jìn)行輸血治療的內(nèi)科系統(tǒng)疾病例如惡性腫瘤放化療后的造血損傷作為我們細(xì)胞產(chǎn)品適合應(yīng)用的疾病類型,并以惡性腫瘤尤其是惡性血液病放化療后的造血損傷為適應(yīng)癥開展臨床試驗(yàn)研究,如果能解決這部分患者血液來源以及治療效果的問題,那么將具有重要的社會(huì)價(jià)值與經(jīng)濟(jì)效益。
　　二、研究目的
　　本研究針對前期已獲SFD

8、A臨床試驗(yàn)批文的“巨核系祖細(xì)胞注射液”,選擇可以定期或擇機(jī)擇時(shí)進(jìn)行輸血治療的惡性腫瘤尤其是惡性血液病放化療后造血損傷為適應(yīng)癥,并依據(jù)適應(yīng)癥的特點(diǎn)對細(xì)胞產(chǎn)品的制備技術(shù)與質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)等進(jìn)行相應(yīng)修改、補(bǔ)充、調(diào)整及完善,隨后開展臨床試驗(yàn)研究,證實(shí)細(xì)胞產(chǎn)品的生物安全性及治療有效性,繼而獲得國家相關(guān)主管部門的臨床使用許可,為臨床成分輸血和戰(zhàn)時(shí)血液保障提供新的血細(xì)胞來源。同時(shí),由于這兩項(xiàng)臍帶血造血細(xì)胞產(chǎn)品是嚴(yán)格遵守《中華人民共和國藥品管理法》及參考國際相

9、關(guān)標(biāo)準(zhǔn)研發(fā)的新型治療性干/祖細(xì)胞產(chǎn)品,在臨床試驗(yàn)過程中將嚴(yán)格按照臨床試驗(yàn)批件、國家衛(wèi)生部《醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用管理辦法》以及參照國際干細(xì)胞研究學(xué)會(huì)《干細(xì)胞臨床轉(zhuǎn)化指南》等相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究,為干細(xì)胞從基礎(chǔ)研究到臨床應(yīng)用的轉(zhuǎn)化探索出一條規(guī)范之路。
　　三、主要研究內(nèi)容與方法
　　1.根據(jù)“臍帶血巨核系祖細(xì)胞注射液”Ⅰ期安全性臨床試驗(yàn)研究結(jié)果,修改并完善細(xì)胞產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)化制備操作規(guī)程、質(zhì)量控制操作規(guī)程、運(yùn)輸與保存操作規(guī)程、臨床輸注標(biāo)準(zhǔn)化

10、操作規(guī)程。
　　2.建立并制定“臍帶血巨核系祖細(xì)胞注射液”有效性臨床試驗(yàn)研究方案,建立并制定標(biāo)準(zhǔn)化臨床有效性指標(biāo)檢測操作規(guī)程。
　　3.整理“臍帶血巨核系祖細(xì)胞注射液治療腫瘤放化療后血小板減少臨床試驗(yàn)研究”相關(guān)材料,申報(bào)總后勤部衛(wèi)生部臨床新技術(shù)批文,并開展有效性臨床試驗(yàn)研究。
　　4.建立并制定“臍帶血巨核系祖細(xì)胞注射液”的有效性臨床試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化研究方案,確保臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)、真實(shí)、可控及科學(xué)。
　　5.完成臨床

11、試驗(yàn)研究的細(xì)胞產(chǎn)品的制備、質(zhì)控及指標(biāo)檢測,并收集、整理、分析臨床有效性試驗(yàn)數(shù)據(jù)。
　　四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
　　1.通過整理與分析臍帶血巨核系祖細(xì)胞Ⅰ期臨床試驗(yàn)的細(xì)胞產(chǎn)品的制備、質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)及臨床生物安全性試驗(yàn)數(shù)據(jù),修改與完善了細(xì)胞產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)化制備操作規(guī)程、質(zhì)量控制操作規(guī)程、運(yùn)輸與保存操作規(guī)程、臨床輸注標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程、原始試驗(yàn)記錄(樣表)等文件。
　　2.整理申報(bào)總后勤部衛(wèi)生部臨床新技術(shù)“臍帶血巨核系祖細(xì)胞注射液治療腫瘤放化療后血

12、小板減少臨床試驗(yàn)研究”有關(guān)細(xì)胞制備與質(zhì)量控制部分的材料,并于2011年5月獲得批文。
　　3.從2011年10月至2013年04月,共制備“臍帶血巨核系祖細(xì)胞注射液”45例。經(jīng)檢定,細(xì)胞狀態(tài)良好,細(xì)胞擴(kuò)增率達(dá)5-10倍,細(xì)胞存活率均為90%以上,巨核系祖細(xì)胞特異性表面標(biāo)志CD41的表達(dá)率為40-60%,細(xì)菌及真菌檢測、支原體檢測、內(nèi)毒素檢測等均為陰性,45例細(xì)胞產(chǎn)品全部符合質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。
　　4.從2011年10月至2013