膠質(zhì)瘤中PIN1-NANOG相關(guān)通路表達的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：
　　通過研究正常腦組織、不同病理級別膠質(zhì)瘤組織以及膠質(zhì)瘤細胞系U87中PIN1、NANOG基因的表達，使用PIN1特異性抑制劑PiB干擾U87膠質(zhì)瘤細胞系，研究PIN1、NANOG基因的表達情況以及對膠質(zhì)瘤生物學(xué)活性的影響，為后續(xù)進一步研究PIN1-NANOG相關(guān)通路的表觀遺傳學(xué)干預(yù)治療奠定基礎(chǔ)。
　　方法：
　?、倜庖呓M化法檢測84例膠質(zhì)瘤和10例正常腦組織標本中PIN1、NANOG表達情況。
　?、谝?/p>

2、1.0μmol/L PiB處理U87細胞24 h為1.0μmol/L PiB組，未經(jīng)任何處理的U87細胞作為對照組，免疫熒光雙染檢測細胞PIN1、NANOG的表達，RT-PCR和Western blotting檢測細胞PIN1、NANOG mRNA和蛋白的表達。
　?、弁ㄟ^MTT、Transwell細胞遷移侵襲實驗等方法檢測抑PIN1-NANOG相關(guān)通路表達后對膠質(zhì)瘤細胞體內(nèi)外生物學(xué)活性的影響。
　　結(jié)果：
　?、賅H

3、OⅡ級1、Ⅲ級、Ⅳ級膠質(zhì)瘤PIN1、NANOG高表達率不同，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，且膠質(zhì)瘤級別越高，PIN1、NANOG高表達率越高；
　　②MTT檢測顯示PiB對U87細胞的增殖有抑制作用，且呈劑量和濃度依賴性。
　　③與對照組比較，1.0μmol/L PiB組PIN1+、NANOG+及PIN1+/NANOG+陽性細胞百分比降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；
　?、軐φ战M和1.0μmol/L PiB

4、組細胞PIN1 mRNA的表達量分別為1.82±0.03和0.94±0.20，NANOG的表達量分別為1.47±0.04和0.82±0.19，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，對照組和1.0μmol/L PiB組細胞PIN1蛋白表達量分別為2.96±0.05和1.15±0.26，NANOG蛋白表達量分別為1.52±0.16和0.75±0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　?、軹ranswell試驗細胞的遷移[遷移細胞數(shù)(

5、36.40±1.14)個/視野vs(86.00±1.58)個/視野]和侵襲能力[穿膜細胞數(shù)(28.20±1.92)個/視野 vs(59.20±3.27)個/視野)]下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　?、貾IN1、NANOG在膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，且與腫瘤的惡性程度相關(guān)。
　?、赑IN1可參與調(diào)控NANOG，兩者之間存在相關(guān)通路。
　?、巯抡{(diào)PIN1-NANOG通路后，膠質(zhì)瘤細胞遷移侵