天然抗氧化劑對(duì)乳腺癌MCF-7-ADM細(xì)胞的耐藥逆轉(zhuǎn)作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：多藥耐藥(MDR)是導(dǎo)致腫瘤化療失敗的主要原因，從多種中藥單體或化合物中篩選高效低毒的腫瘤躲藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑是逆轉(zhuǎn)耐藥的策略之一。本研究以人乳腺癌細(xì)胞敏感株 MCF-7和耐藥株 MCF-7/ADM為模型，從白藜蘆醇(Res)、番茄紅素(Lyc)、原花青素(PC)、葉黃素(Lut)、丹皮酚(Pae)、橙皮苷(Hes)、和阿魏酸(Fera)等7種天然抗氧化成分中篩選腫瘤 MDR逆轉(zhuǎn)劑，并初步探討其耐藥逆轉(zhuǎn)活性及作用機(jī)制，為臨床上乳腺癌多藥

2、耐藥性的治療提供新的逆轉(zhuǎn)方法。
　　方法：(1)采用 MTT法對(duì) Res、Lyc、PC、Lut、Pae、Hes和Fera七種抗氧化劑進(jìn)行的細(xì)胞毒性及耐藥逆轉(zhuǎn)效果檢測(cè)；(2)采用 MTT法檢測(cè)葉黃素對(duì)敏感株 MCF-7和耐藥株 MCF-7/ADM細(xì)胞的細(xì)胞毒性及耐藥逆轉(zhuǎn)作用；(3)采用激光共聚焦顯微鏡技術(shù)和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)葉黃素對(duì)敏感株 MCF-7和耐藥株 MCF-7/ADM細(xì)胞內(nèi)ADM蓄積的影響及細(xì)胞凋亡的變化。
　　結(jié)果：(

3、1)MCF-7/ADM細(xì)胞是人乳腺癌 MCF-7細(xì)胞經(jīng)阿霉素(ADM)選擇而建立的MDR細(xì)胞。本研究采用 MTT法，以MCF-7/ADM細(xì)胞為模型，對(duì)7種抗氧化劑進(jìn)行體外篩選。結(jié)果表明，橙皮苷、丹皮酚在出現(xiàn)明顯細(xì)胞毒性劑量的情況下，仍未出現(xiàn)明顯的逆轉(zhuǎn)作用。白藜蘆醇2μg/ml，原花青素4μg/ml，番茄紅素40μg/ml，葉黃素20μg/ml，阿魏酸3μg/ml，對(duì) ADM的耐藥倍數(shù)分別為1.28、1.27、1.43、1.39、1.09

4、。而在敏感株MCF-7細(xì)胞，除了番茄紅素，其他幾種藥物對(duì)ADM細(xì)胞毒性無明顯影響。(2)在敏感株MCF-7和耐藥株MCF-7/ADM細(xì)胞，測(cè)定不同濃度葉黃素與化療藥物合用時(shí)對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制作用，結(jié)果顯示隨著葉黃素濃度的逐漸增加，ADM及長春新堿(VCR)的細(xì)胞毒性性也逐漸增強(qiáng)。(3)ADM藥物蓄積實(shí)驗(yàn)證明，葉黃素可劑量依賴性和時(shí)間依賴性的增加敏感株 MCF-7和耐藥株 MCF-7/ADM細(xì)胞內(nèi)阿霉素的蓄積量。細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)表明，40μg/