被動吸煙對實驗性牙周炎大鼠牙周組織的影響及槲皮素的保護作用.pdf

1、目的:通過大鼠牙周結扎、被動吸煙和槲皮素灌喂8周，建立牙周炎和被動吸煙牙周炎及槲皮素干預大鼠模型。對比觀察大鼠牙周組織形態(tài)學變化，檢測大鼠牙周組織中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、環(huán)氧化酶-2(COX-2)含量。探討被動吸煙對牙周炎大鼠牙周組織的影響，槲皮素對牙周炎及被動吸煙牙周炎大鼠牙周組織的保護作用。
　　方法:選用60只體重300g左右的6月齡健康雄性Wistar大鼠，隨機分為六組:正常對照組（N組），被動吸煙組（P組），單

2、純結扎組(L組)，被動吸煙結扎組（LP組），單純結扎+槲皮素組(LQ組)，被動吸煙結扎+槲皮素組（LPQ組），每組10只。正常組不加干預措施，正常喂養(yǎng)。L組、LQ組、LP組、LPQ組大鼠給予全身麻醉，以直徑0.20mm的正畸鋼絲結扎雙側上頜第一磨牙牙頸部。LQ組，LPQ組大鼠給予槲皮素50mg/kg灌喂。LPQ組并于灌喂60min后采用密閉空間內熏煙的方法進行被動吸煙的干預，每次60min，每次10只香煙。P組，LP組進行相同的被動吸煙

3、處理。給藥和被動吸煙8周后，處死各組大鼠，保留上頜骨，立即放入10％甲醛溶液固定48小時，然后經10％EDTA溶液脫鈣8周，制作牙體牙周組織連續(xù)切片。各組切片行HE染色，光鏡下觀察牙周組織的形態(tài)學變化，并采用免疫組織化學染色法檢測各組牙周組織中TNF-α、COX-2的水平變化，作統(tǒng)計學分析。
　　結果:
　　1牙周炎大鼠模型的建立:
　　單純結扎組大鼠上頜第一磨牙肉眼觀察:結扎8周，牙齦紅腫，觸及出血，牙周袋形成。牙體

4、牙周組織切片鏡下觀察:結扎8周，結合上皮向根方增殖，形成淺牙周袋;溝內上皮和結合上皮下結締組織內可見淋巴細胞等炎細胞浸潤;牙齦與牙周膜纖維溶解、排列紊亂;牙槽骨吸收，表面呈蠶食狀，可見破骨細胞。說明實驗性牙周炎大鼠模型成功建立。
　　2實驗性牙周炎大鼠牙周組織病理學觀察:
　　正常組:牙齦乳頭形態(tài)基本完整，結合上皮位于釉牙骨質界處，結締組織內無明顯炎細胞浸潤，牙周膜纖維排列整齊，牙槽嵴頂無吸收。
　　被動吸煙組:牙齦乳

5、頭結構不良，結合上皮附著于釉牙骨質界處，溝內上皮及結合上皮下有少量炎細胞浸潤，牙槽嵴頂形態(tài)不規(guī)則。
　　單純結扎組:牙齦上皮釘突伸長，結合上皮離開釉牙骨質界，向根方增殖，形成牙周袋，結締組織內見較多的炎癥細胞浸潤，牙周膜纖維排列紊亂，血管擴張充血，牙槽骨吸收，牙槽嵴頂處可見破骨細胞。
　　被動吸煙結扎組:牙齦乳頭形態(tài)破壞，結合上皮向根方增殖，形成較深的牙周袋，有的深達根尖1/3，結締組織內見較多的淋巴細胞等炎細胞，牙槽骨吸收

6、明顯，可見明顯的吸收陷窩和破骨細胞。
　　結扎+槲皮素組:牙齦乳頭結構破壞，結合上皮向根方增殖，形成牙周袋，結締組織內見炎細胞浸潤，牙槽骨內見少量破骨細胞，較多成骨細胞，可見新生骨。
　　被動吸煙結扎+槲皮素組:結合上皮向根方增殖，有牙周袋形成，結締組織內見炎細胞浸潤，牙槽骨內見少量的骨吸收陷窩和破骨細胞，牙槽嵴頂見成骨細胞。
　　3實驗大鼠牙周組織中TNF-α、COX-2的表達
　　3.1實驗大鼠牙周組織中TN

7、F-α的的表達:
　　TNF-α在牙周組織中主要表達于牙周膜成纖維細胞、破骨細胞及血管內皮細胞中，陽性染色為黃色或棕黃色顆粒。其六組的平均光密度值分別為:正常組:0.129±0.008;被動吸煙組:0.142±0.011;單純結扎組:0.174±0.012;被動吸煙結扎組:0.289±0.012;結扎+槲皮素組:0.154±0.009;被動吸煙結扎+槲皮素組:0.196±0.003。
　　平均光密度值測定統(tǒng)計分析結果:

8、>　　3.1.1單純結扎組、被動吸煙結扎組高于正常組（P＜0.05）
　　3.1.2被動吸煙組高于正常組（P＜0.05），被動吸煙結扎組明顯高于單純結扎組（P＜0.05）
　　3.1.3結扎+槲皮素組低于單純結扎組（P＜0.05）
　　3.1.4被動吸煙結扎+槲皮素組明顯低于被動吸煙結扎組（P＜0.05）
　　3.2實驗大鼠牙周組織中COX-2的表達:
　　COX-2在牙周組織中主要位于牙周膜成纖維細胞、骨

9、細胞和成骨細胞中，陽性染色為黃色或棕黃色顆粒。其六組的平均光密度值分別為:正常組:0.120±0.015;被動吸煙組:0.136±0.014;單純結扎組:0.182±0.008;被動吸煙結扎組:0.298±0.008;結扎+槲皮素組:0.143±0.002;被動吸煙結扎+槲皮素組:0.205±0.006。
　　平均光密度值測定統(tǒng)計分析結果:
　　3.2.1單純結扎組、被動吸煙結扎組高于正常組（P＜0.05）
　　3.2

10、.2被動吸煙組高于正常組（P＜0.05），被動吸煙結扎組明顯高于單純結扎組（P＜0.05）
　　3.2.3結扎+槲皮素組低于單純結扎組（P＜0.05）
　　3.2.4被動吸煙結扎+槲皮素組明顯低于被動吸煙結扎組（P＜0.05）
　　結論:
　　1.正畸鋼絲結扎大鼠上頜第一磨牙及吸煙箱給予大鼠被動吸煙成功建立大鼠牙周炎及被動吸煙牙周炎模型。
　　2.被動吸煙組比正常組牙周組織中炎細胞增多，TNF-α、COX-