FACL4抑制劑Triacsin C誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞HepG2凋亡的機(jī)制研究.pdf

1、目的：已證實(shí)脂肪酸輔酶A連接酶4(fatty acid CoA．1igase 4，F(xiàn)ACL4)抑制劑Triacsin C對(duì)HepG2細(xì)胞有明顯凋亡誘導(dǎo)作用的基礎(chǔ)上，本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步探討其誘導(dǎo)凋亡的分子機(jī)制。 方法：體外培養(yǎng)HepG2肝癌細(xì)胞，Tdacsin C以不同濃度或不同時(shí)間干預(yù)后，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞線粒體跨膜電位變化，應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)S-P染色法檢測(cè)細(xì)胞凋亡相關(guān)基因Bcl-2、Bax、p53在細(xì)胞中的表達(dá)情況，應(yīng)用比色法檢

2、測(cè)細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白酶Casepase-3、Casepase-8、Casepase-9的活性變化。 結(jié)果：1、流式細(xì)胞儀結(jié)合Rhodaminel23染色結(jié)果顯示Triacsin C作用后HepG2細(xì)胞線粒體跨膜電位下降，且呈時(shí)間、劑量依賴性。2、S-P免疫組化染色結(jié)果顯示：空白對(duì)照組HepG2細(xì)胞p53和Bcl．2蛋白均呈高表達(dá)，Bax呈相對(duì)低表達(dá)；Triacsin C作用后p53和Bcl．2蛋白表達(dá)下降，且p53較Bcl-2明顯

3、，Bax蛋白表達(dá)增加，上述變化均呈劑量依賴性，與對(duì)照組相比有顯著性差異(p<0.01)。3、比色法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)Triacsin C誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡過程中，Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白酶活性呈時(shí)間依賴性及劑量依賴性增高，Caspase-3和Caspase-9增高尤其明顯，與對(duì)照組相比有顯著性差異(p<0.01)。 結(jié)論：1、FACL4抑制劑Triacsin C作用于HepG2細(xì)胞后線粒體膜電位明