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文檔簡介
1、隨著工業(yè)的發(fā)展,大量有機(jī)污染物的排放,使得環(huán)境中有機(jī)物的污染日益嚴(yán)重,尤其是持久性有機(jī)污染物(persistent organic pollutants,POPs)的污染問題已經(jīng)引起廣泛的關(guān)注。由于持久性有機(jī)污染物種類繁多,并在生物群落中累積,而且其對于動物及人類健康的影響往往具有協(xié)同作用,人類長期處于低劑量暴露狀態(tài)。因此,研究POPs長期低劑量聯(lián)合作用對人類健康的影響顯得十分重要。經(jīng)過本課題組前期對重慶主城區(qū)及三峽庫區(qū)水中有機(jī)物的檢測
2、發(fā)現(xiàn),鄰苯二甲酸酯類和多環(huán)芳烴類是污染最為廣泛的兩類有機(jī)污染物,其中鄰苯二甲酸酯類的鄰苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,DBP)污染最為嚴(yán)重,而苯并[a]芘(benzo(a)pyrene,B[a]P)則是多環(huán)芳烴類化合物中毒性最強(qiáng)的。以往的研究表明DBP具有顯著的雄性生殖毒性,可導(dǎo)致雄性嚙齒類動物睪丸萎縮、重量減輕、睪丸標(biāo)志酶活性下降、精母細(xì)胞和精子細(xì)胞喪失、曲細(xì)精管變性萎縮、生殖道畸形等生殖損害。對B[a]P研究主要
3、集中在它的致癌性及其機(jī)制,生殖毒性研究相對較少,也有研究結(jié)果表明B[a]P具有雄性生殖毒性,可以導(dǎo)致睪丸重量減輕,精子數(shù)量和精子活力下降,睪酮濃度下降。但以往的研究多是采用單一化合物高劑量染毒,其結(jié)果并不能很好地反映低劑量聯(lián)合暴露下的損傷作用。 為進(jìn)一步搞清重慶市主城區(qū)及三峽庫區(qū)水中兩類主要有機(jī)污染物聯(lián)合毒性及其作用機(jī)制,本研究選用DBP和B[a]P作為有機(jī)污染物的代表,單獨和聯(lián)合作用于雄性大鼠,從整體水平觀察其生殖毒性作用,并
4、利用分子生物學(xué)技術(shù)探討其可能的毒性作用機(jī)制。 主要研究結(jié)果如下: 1、本實驗顯示DBP和B[a]P對大鼠的體重及一般情況無明顯影響,重要臟器未見明顯的病變,睪丸及附睪臟器系數(shù)無明顯改變,肝臟器系數(shù)有增加趨勢,提示肝臟對化合物的毒性作用較為敏感。 2、組織病理觀察顯示DBP在本實驗劑量下對大鼠睪丸組織形態(tài)學(xué)改變不明顯,而B[a]P可以引起睪丸曲細(xì)精管萎縮,生精細(xì)胞層數(shù)減少,生精上皮空泡變性等病理改變。電鏡觀察顯示兩
5、類化合物均可以引起睪丸細(xì)胞線粒體腫脹,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張等損害。兩者聯(lián)合使用后的作用與B[a]P單獨使用的作用類似,但聯(lián)合使用后的毒性未見明顯增加。 3、精子評價結(jié)果:DBP和B[a]P在染毒早期刺激精子數(shù)量增加,二者聯(lián)合使用后呈現(xiàn)出與DBP單獨使用一樣的趨勢。在染毒后期,刺激效應(yīng)消失,低劑量聯(lián)合染毒組精子數(shù)量明顯下降。B[a]P組在染毒3個月后精子畸形率明顯增加,而DBP組改變不明顯,高劑量聯(lián)合染毒組在染毒的第一、三個月畸形率均增高。
6、 4、DBP和B[a]P在一定濃度和染毒時間內(nèi)均可以刺激睪酮的分泌,B[a]P的刺激作用強(qiáng)于DBP,二者聯(lián)合后的興奮效應(yīng)弱于B[a]P單獨作用。 5、DBP和B[a]P均可以影響支持細(xì)胞ABP和Tf的 mRNA表達(dá),而且都表現(xiàn)為先抑制后增強(qiáng)的趨勢,但對Tf的增強(qiáng)作用要晚于ABP。二者聯(lián)合使用后的變化趨勢與單獨染毒組類似。 6、DBP和B[a]P對睪丸組織抗氧化系統(tǒng)的影響不明顯,B[a]P可以抑制SOD酶的活力,但
7、對CAT酶的活力表現(xiàn)為增強(qiáng)作用,二者聯(lián)合使用后對SOD及GSH-PX的活力有一定的影響,對CAT酶仍表現(xiàn)為增強(qiáng)作用。各染毒組的MDA含量無明顯增加,提示機(jī)體處于代償狀態(tài),未產(chǎn)生明顯的氧化損傷。 7、DBP和B[a]P低劑量組均可以抑制細(xì)胞的增殖,而兩個高劑量組都呈現(xiàn)出一過性的刺激細(xì)胞增殖的現(xiàn)象,但隨著染毒時間延長,這種刺激作用消失。二者聯(lián)合使用后仍然明顯抑制了細(xì)胞增殖,但與單獨染毒組比較差異不明顯。 8、DBP沒有明顯誘
8、導(dǎo)生精細(xì)胞凋亡,B[a]P兩個劑量組均明顯誘導(dǎo)了細(xì)胞凋亡,提示B[a]P具有比DBP更強(qiáng)的生殖毒性,兩者聯(lián)合使用后仍然可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,顯示出類似B[a]P單獨使用的作用,但聯(lián)合使用后毒性未見增強(qiáng)。 9、各染毒組ERK的總蛋白表達(dá)變化相差不顯著,DBP低劑量組可以明顯抑制磷酸化ERK1/2的表達(dá),而B[a]P則是高劑量組抑制了磷酸化ERK1/2的表達(dá),聯(lián)合染毒后仍然抑制磷酸化蛋白的表達(dá),但兩個劑量組出現(xiàn)抑制效應(yīng)的時間不一致。
9、 10、DBP和B[a]P低劑量組均可誘導(dǎo)磷酸化的JNK和總JNK的表達(dá),而高劑量組只增加了JNK的磷酸化水平,對總JNK表達(dá)無影響。二者聯(lián)合使用后不影響JNK總蛋白的表達(dá),只在染毒3個月時明顯增加了磷酸化JNK的表達(dá),聯(lián)合染毒組與單獨染毒組差異不顯著。 結(jié)論: DBP和B[a]P在本實驗劑量下均對雄性生殖系統(tǒng)有一定的損傷作用,但這種損傷作用并不都表現(xiàn)為抑制效應(yīng),在某些指標(biāo)上反而顯現(xiàn)出興奮效應(yīng),如睪酮的合成,支持細(xì)
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