鄰苯二甲酸二丁酯對(duì)F1代斑馬魚的毒性研究.pdf_第1頁
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1、隨著工業(yè)的迅速發(fā)展,越來越多的化學(xué)物隨著人類生產(chǎn)和生活排放到環(huán)境中,給人類及其賴以生存的環(huán)境帶來了隱患。鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)屬于鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)(PAEs),是一類重要的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物(EDCs),它主要作為塑料產(chǎn)品的增塑劑和軟化劑。近年來,隨著塑料垃圾的大量增加,DBP及其它各類PAEs成為全球性最普遍的污染物之一,其健康危害引起了廣泛關(guān)注。
  本研究探討了低濃度DBP的生殖發(fā)育毒性及遠(yuǎn)期效應(yīng)。選用模式生物斑馬魚,將

2、48對(duì)成年斑馬魚隨機(jī)分為4組:空白對(duì)照組、丙酮溶劑對(duì)照組、1250μg/LDBP高劑量組、和625μg/LDBP低劑量組,每組12對(duì)。連續(xù)暴露于DBP30天后,將各組的雌雄魚交配,孵化出的F1代斑馬魚在清水中飼養(yǎng)至180dph。將所得F1代成年斑馬魚混合自然交配,記錄其產(chǎn)卵量、受精率和72h孵化率。為進(jìn)一步了解DBP暴露分別對(duì)F1代雄魚和雌魚生殖能力的影響,設(shè)計(jì)與對(duì)照組雌/雄魚分別進(jìn)行的置換交配實(shí)驗(yàn)。每個(gè)DBP處理組的F1代隨機(jī)選12條

3、雄魚與對(duì)照組12條雌魚進(jìn)行自然交配。同樣的置換也被用于每個(gè)DBP處理組的雌魚,記錄其產(chǎn)卵量、受精率和72h孵化率。測(cè)量F1代斑馬魚身長(zhǎng)、體重等生長(zhǎng)發(fā)育指標(biāo),進(jìn)行性腺的病理組織學(xué)檢查,同時(shí)檢測(cè)卵黃蛋白原(VTG)mRNA表達(dá)的變化以考察DBP對(duì)斑馬魚是否具有雌激素效應(yīng)。
  結(jié)果顯示,625μg/LDBP處理組F1代斑馬魚平均每缸魚的產(chǎn)卵數(shù)為114.5枚,與空白對(duì)照組和溶劑對(duì)照組相比顯著減少;1250μg/L處理組的雌魚產(chǎn)卵極少,每

4、缸小于10個(gè)魚卵,顯著低于空白對(duì)照組與溶劑對(duì)照組(p<0.01)。無論是雌魚還是雄魚,625μg/LDBP處理組與1250μg/L的DBP處理組F1代斑馬魚平均體長(zhǎng)均顯著低于空白對(duì)照組和溶劑對(duì)照組。置換交配試驗(yàn)中,DBP組F1代雄魚被對(duì)照組F1代雄魚代替時(shí)平均每缸產(chǎn)卵數(shù)為394±46枚,受精率92±6%,而對(duì)照處理組每缸產(chǎn)卵數(shù)432±38枚,受精率為95±8%,兩者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;而DBP組F1代雌魚被對(duì)照組F1代雌魚代替時(shí),單次交配

5、平均每缸產(chǎn)卵數(shù)為56±14個(gè),受精率為36±10%,無論是產(chǎn)卵數(shù)還是受精率與對(duì)照組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
  卵巢組織病理學(xué)檢查顯示,與對(duì)照組相比,625μg/LDBP處理組F1代雌性斑馬魚卵巢組織中仍可見大量成熟的卵黃生成期卵母細(xì)胞(Voc),提示卵巢發(fā)育均成熟有產(chǎn)卵能力,但早期的核周卵母細(xì)胞(Poc)輕微增多。1250μg/LDBP處理組F1代雌性斑馬魚卵巢組織中成熟的Voc細(xì)胞略微減少,皮質(zhì)囊泡期卵母細(xì)胞(Coc)及Poc

6、細(xì)胞增多,提示卵巢發(fā)育可能受到輕微的抑制。精巢組織病理學(xué)檢查則顯示DBP處理組的F1代雄性斑馬魚精巢發(fā)育受到明顯抑制,生精小管畸形、精子數(shù)量減少及間質(zhì)(Leydig)細(xì)胞增生同時(shí)存在于精巢中。VTGmRNA表達(dá)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)DBP暴露不誘導(dǎo)VTGmRNA在染毒親代及F1代雄魚體內(nèi)表達(dá),提示DBP對(duì)斑馬魚無雌激素樣效應(yīng)。
  DBP對(duì)斑馬魚的毒效應(yīng)與它引發(fā)雄性大鼠、狨猴和人類的睪丸反應(yīng)相類似,因此為研究睪丸發(fā)育不全綜合征(TDS)提供了一

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