血管內(nèi)皮生長因子基因多態(tài)性與非小細胞肺癌遺傳易感性的相關(guān)性研究.pdf

1、目的:
　　原發(fā)性支氣管肺癌（簡稱肺癌）是起源于支氣管黏膜或腺體的肺部最常見的惡性腫瘤，到目前為止肺癌已經(jīng)上升為各種惡性腫瘤的第1位。肺癌對人類的生命健康和生活質(zhì)量產(chǎn)生了嚴重的影響，20世紀以來，由于環(huán)境惡化、職業(yè)暴露和吸煙人口的上升，肺癌的發(fā)病率和死亡率也急劇的上升。肺癌在上個世紀初還被認為是一種相當罕見的疾病，但現(xiàn)在每年全世界都有150萬人被新診斷為肺癌。在過去30年中，我國肺癌死亡率已上升到17.27/10萬左右，超過了食管

2、癌、肝細胞癌、胃癌和宮頸癌之前，排在了惡性腫瘤死亡率的第一位。根據(jù)流行病學的研究表明，肺癌的發(fā)病與吸煙等因素關(guān)系密切，有吸煙史者肺癌的發(fā)病率比不吸煙者高達10倍，但是吸煙者僅有15％會罹患肺癌，這說明吸煙只是能夠增加易感人群的肺癌發(fā)病率及死亡率，隨著肺癌流行病學和分子生物學研究水平的不斷進步，關(guān)于肺癌遺傳易感性方向的研究也逐步受到人們的重視。
　　新生毛細血管的形成是肺癌等原發(fā)腫瘤增殖生長的必須條件，對惡性腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移更是必不可

3、少的，癌細胞需要從新生毛細血管持續(xù)補充營養(yǎng)以來保證他們的轉(zhuǎn)移。研究發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)皮生長因子、血管抑素和纖維蛋白生長因子等30余種因子與腫瘤血管生成相關(guān)，其中血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)是一種內(nèi)皮細胞的特異性絲裂原，能特異作用于血管內(nèi)皮細胞，促進內(nèi)皮細胞分裂、增殖及遷移，在腫瘤新生血管生成過程中起著關(guān)鍵的作用。進來研究顯示，肺癌的新生血管的生長和生物學行為關(guān)系密切，惡變細

4、胞常常伴隨著VEGF的高表達，肺癌組織中VEGF的表達水平明顯高于正常組織，而且也是判斷肺癌預后的重要指標之一。
　　人VEGF的基因位于6號染色體p21.3，由7個內(nèi)含子和8個外顯子構(gòu)成，全長28kb。研究發(fā)現(xiàn)VEGF基因位點的多態(tài)性和肺癌的遺傳易感性有關(guān)。本實驗研究采用病例-對照方法，探討VEGF基因啟動子區(qū)VEGF-1154G/A和+405G/C的單核苷酸多態(tài)性(singlenucleotide polymorphism，S

5、NP)與漢族人群肺癌患者發(fā)病風險的關(guān)系。
　　方法:
　　本實驗采用嚴格的病例對照研究方法。所選病例來自2003年-2013年間在河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院胸外科的住院病人，均經(jīng)術(shù)后病例證實為原發(fā)性非小細胞肺癌。其中包括男性291例，女性116例，平均年齡60.26歲，共407例。對照組為健康體檢人員，其中男性158例，女性112例，平均年齡59.55歲，共270例。均抽取空腹外周血液5ml并記錄病史及各項相關(guān)資料，于1周內(nèi)采用蛋

6、白酶K消化-飽和氯化鈉鹽析法提取DNA。用聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)分析法和引物介導的限制性聚合酶鏈反應(PIRA-PCR)法檢測VEGF-1154G/A和VEGF+405G/C SNPs的基因型的分布頻率。本實驗所有數(shù)據(jù)分析統(tǒng)計采用的軟件為SPSS16.0版統(tǒng)計軟件包，當P＜0.05時，就判定差異有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果:
　　1肺癌實驗組與健康對照組間的年齡分布經(jīng)one-way ANOVA檢驗

7、統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)肺癌實驗組和健康對照組間無顯著性差異(x2=81.222，P=0.340)。
　　2通過對肺癌實驗組和健康對照組的比較發(fā)現(xiàn)，肺癌實驗組中吸煙人數(shù)為228，健康對照組中吸煙人數(shù)為40，比例分別占各組人數(shù)的56.0％、14.8％，兩組間存在顯著性差異(p=0.000)。這說明吸煙可增加人群中肺癌發(fā)病的風險;家族史在肺癌實驗組和健康對照組間無顯著性差異（x2=1.126，P＞0.05）。
　　3 VEGF-1154G/A在

8、肺癌實驗組與健康對照組中的GG、AG、AA頻率分別為69.8％、28.0％、2.2％和71.5％、25.9％、2.6％，兩組基因型的分布比較無統(tǒng)計學意義(P=0.808)，說明VEGF-1154G/A多態(tài)性與非小細胞肺癌的發(fā)病無相關(guān)性。
　　4在肺癌實驗組中VEGF+405G/C中GG、CG、CC的比例分別為25.1％、45.3％、29.6％;在健康對照組中三種基因型的比例分別為39.6％、48.3％、12.2％，經(jīng)統(tǒng)計x2=21

9、.944，P＜0.01，說明兩組間的差異有統(tǒng)計學意義。其中兩組間的GG、CG兩者間比較發(fā)現(xiàn)，CG基因型顯著增加非小細胞肺癌的發(fā)病風險（OR值為1.174，95％CI為1.013-1.361）;GG、CC兩種基因型經(jīng)比較發(fā)現(xiàn)顯示，CC基因型明顯增加非小細胞肺癌的發(fā)病風險(OR值為1.924，95％CI為1.412-2.620)，這也說明GG基因型可降低正常人群非小細胞肺癌的發(fā)病風險。
　　5對VEGF+405G/A的三種基因型依據(jù)腫

10、瘤大小、病理類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分期、腫瘤分期分別進行分層分析發(fā)現(xiàn):腫瘤大小與基因型的分布無顯著性差異(x2=0.193，P＞0.05);病理類型與三種基因型的分無無顯著性差異(x2=7.990，P＞0.05);淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分期與基因型分布的差異無統(tǒng)計學意義(x2=4.514，P＞0.05);腫瘤分期與三種基因型的分布無顯著性差異(x2=2.971，P＞0.05)。
　　6依據(jù)有無吸煙史對VEGF+405G/A的三種基因型進行分層分析發(fā)

11、現(xiàn):吸煙史與基因型分布的差異無統(tǒng)計學意義(x2=2.786，P＞0.05);無吸煙史的患者與VEGF+405G/A基因型分布的差異有統(tǒng)計學意義(x2=21.443，P＜0.05)，其中GG與CC比較發(fā)現(xiàn)，CC明顯增加無吸煙史患者的非小細胞肺癌發(fā)病風險。
　　結(jié)論:
　　1吸煙可以明顯增加人群肺癌發(fā)病率，而這種增加與VEGF+405G/C的基因型分布無關(guān)。
　　2 VEGF-1154G/A在實驗組與健康組間的分布無統(tǒng)計學