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文檔簡介
1、目的:
原發(fā)性支氣管肺癌(簡稱肺癌)是起源于支氣管黏膜或腺體的肺部最常見的惡性腫瘤,到目前為止肺癌已經(jīng)上升為各種惡性腫瘤的第1位。肺癌對人類的生命健康和生活質(zhì)量產(chǎn)生了嚴重的影響,20世紀以來,由于環(huán)境惡化、職業(yè)暴露和吸煙人口的上升,肺癌的發(fā)病率和死亡率也急劇的上升。肺癌在上個世紀初還被認為是一種相當罕見的疾病,但現(xiàn)在每年全世界都有150萬人被新診斷為肺癌。在過去30年中,我國肺癌死亡率已上升到17.27/10萬左右,超過了食管
2、癌、肝細胞癌、胃癌和宮頸癌之前,排在了惡性腫瘤死亡率的第一位。根據(jù)流行病學的研究表明,肺癌的發(fā)病與吸煙等因素關(guān)系密切,有吸煙史者肺癌的發(fā)病率比不吸煙者高達10倍,但是吸煙者僅有15%會罹患肺癌,這說明吸煙只是能夠增加易感人群的肺癌發(fā)病率及死亡率,隨著肺癌流行病學和分子生物學研究水平的不斷進步,關(guān)于肺癌遺傳易感性方向的研究也逐步受到人們的重視。
新生毛細血管的形成是肺癌等原發(fā)腫瘤增殖生長的必須條件,對惡性腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移更是必不可
3、少的,癌細胞需要從新生毛細血管持續(xù)補充營養(yǎng)以來保證他們的轉(zhuǎn)移。研究發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)皮生長因子、血管抑素和纖維蛋白生長因子等30余種因子與腫瘤血管生成相關(guān),其中血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)是一種內(nèi)皮細胞的特異性絲裂原,能特異作用于血管內(nèi)皮細胞,促進內(nèi)皮細胞分裂、增殖及遷移,在腫瘤新生血管生成過程中起著關(guān)鍵的作用。進來研究顯示,肺癌的新生血管的生長和生物學行為關(guān)系密切,惡變細
4、胞常常伴隨著VEGF的高表達,肺癌組織中VEGF的表達水平明顯高于正常組織,而且也是判斷肺癌預后的重要指標之一。
人VEGF的基因位于6號染色體p21.3,由7個內(nèi)含子和8個外顯子構(gòu)成,全長28kb。研究發(fā)現(xiàn)VEGF基因位點的多態(tài)性和肺癌的遺傳易感性有關(guān)。本實驗研究采用病例-對照方法,探討VEGF基因啟動子區(qū)VEGF-1154G/A和+405G/C的單核苷酸多態(tài)性(singlenucleotide polymorphism,S
5、NP)與漢族人群肺癌患者發(fā)病風險的關(guān)系。
方法:
本實驗采用嚴格的病例對照研究方法。所選病例來自2003年-2013年間在河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院胸外科的住院病人,均經(jīng)術(shù)后病例證實為原發(fā)性非小細胞肺癌。其中包括男性291例,女性116例,平均年齡60.26歲,共407例。對照組為健康體檢人員,其中男性158例,女性112例,平均年齡59.55歲,共270例。均抽取空腹外周血液5ml并記錄病史及各項相關(guān)資料,于1周內(nèi)采用蛋
6、白酶K消化-飽和氯化鈉鹽析法提取DNA。用聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)分析法和引物介導的限制性聚合酶鏈反應(PIRA-PCR)法檢測VEGF-1154G/A和VEGF+405G/C SNPs的基因型的分布頻率。本實驗所有數(shù)據(jù)分析統(tǒng)計采用的軟件為SPSS16.0版統(tǒng)計軟件包,當P<0.05時,就判定差異有統(tǒng)計學意義。
結(jié)果:
1肺癌實驗組與健康對照組間的年齡分布經(jīng)one-way ANOVA檢驗
7、統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)肺癌實驗組和健康對照組間無顯著性差異(x2=81.222,P=0.340)。
2通過對肺癌實驗組和健康對照組的比較發(fā)現(xiàn),肺癌實驗組中吸煙人數(shù)為228,健康對照組中吸煙人數(shù)為40,比例分別占各組人數(shù)的56.0%、14.8%,兩組間存在顯著性差異(p=0.000)。這說明吸煙可增加人群中肺癌發(fā)病的風險;家族史在肺癌實驗組和健康對照組間無顯著性差異(x2=1.126,P>0.05)。
3 VEGF-1154G/A在
8、肺癌實驗組與健康對照組中的GG、AG、AA頻率分別為69.8%、28.0%、2.2%和71.5%、25.9%、2.6%,兩組基因型的分布比較無統(tǒng)計學意義(P=0.808),說明VEGF-1154G/A多態(tài)性與非小細胞肺癌的發(fā)病無相關(guān)性。
4在肺癌實驗組中VEGF+405G/C中GG、CG、CC的比例分別為25.1%、45.3%、29.6%;在健康對照組中三種基因型的比例分別為39.6%、48.3%、12.2%,經(jīng)統(tǒng)計x2=21
9、.944,P<0.01,說明兩組間的差異有統(tǒng)計學意義。其中兩組間的GG、CG兩者間比較發(fā)現(xiàn),CG基因型顯著增加非小細胞肺癌的發(fā)病風險(OR值為1.174,95%CI為1.013-1.361);GG、CC兩種基因型經(jīng)比較發(fā)現(xiàn)顯示,CC基因型明顯增加非小細胞肺癌的發(fā)病風險(OR值為1.924,95%CI為1.412-2.620),這也說明GG基因型可降低正常人群非小細胞肺癌的發(fā)病風險。
5對VEGF+405G/A的三種基因型依據(jù)腫
10、瘤大小、病理類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分期、腫瘤分期分別進行分層分析發(fā)現(xiàn):腫瘤大小與基因型的分布無顯著性差異(x2=0.193,P>0.05);病理類型與三種基因型的分無無顯著性差異(x2=7.990,P>0.05);淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分期與基因型分布的差異無統(tǒng)計學意義(x2=4.514,P>0.05);腫瘤分期與三種基因型的分布無顯著性差異(x2=2.971,P>0.05)。
6依據(jù)有無吸煙史對VEGF+405G/A的三種基因型進行分層分析發(fā)
11、現(xiàn):吸煙史與基因型分布的差異無統(tǒng)計學意義(x2=2.786,P>0.05);無吸煙史的患者與VEGF+405G/A基因型分布的差異有統(tǒng)計學意義(x2=21.443,P<0.05),其中GG與CC比較發(fā)現(xiàn),CC明顯增加無吸煙史患者的非小細胞肺癌發(fā)病風險。
結(jié)論:
1吸煙可以明顯增加人群肺癌發(fā)病率,而這種增加與VEGF+405G/C的基因型分布無關(guān)。
2 VEGF-1154G/A在實驗組與健康組間的分布無統(tǒng)計學
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