血管內(nèi)皮生長因子在非小細(xì)胞肺癌的表達(dá)及意義.pdf

1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文血管內(nèi)皮生長因子在非小細(xì)胞肺癌的表達(dá)及意義姓名：康峻嶺申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：病理與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：張道榮2002.3.1／材料與方法／＼標(biāo)本：免疫組化所用49例非小細(xì)胞肺癌組織蠟塊來自遼寧省腫瘤醫(yī)院1999年11月一2000年2月外科手術(shù)切除并有隨訪資料的標(biāo)本。隨訪日期從患者出院Et期起計(jì)算，終止日期為2002年3月。WesternBlotting法所用的20例冰凍肺癌組織標(biāo)本來自中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一臨床醫(yī)

2、院2001年3月一2001年6月外科手術(shù)標(biāo)本，該部分病例同時做免疫組織化學(xué)染色。試劑：兔抗人VEGF多克隆抗體購自武漢博士德生物工程有限公司；S—P試劑盒和DAB試劑盒購自福建邁新生物技術(shù)公司；堿性磷酸酶標(biāo)記的羊抗兔二抗購自北京中山生物公司；其余試劑均為國產(chǎn)分析純。方法：免疫組化采用鏈霉素抗生物素蛋白一過氧化酶法(S—P法)。WesternBlotting法按范培昌編著的《生物大分子印跡技術(shù)和應(yīng)用》操作。結(jié)果判定：免疫組化：以腫瘤細(xì)胞胞

3、漿出現(xiàn)特異性棕黃色著色為陽性表達(dá)。按著色強(qiáng)度計(jì)分：無著色為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分。按著色細(xì)胞百分?jǐn)?shù)計(jì)分：70％為3分；將著色強(qiáng)度計(jì)分與著色細(xì)胞百分?jǐn)?shù)計(jì)分相乘，總計(jì)分0分為陰性(一)；1—3分為弱陽性()；4分以上為強(qiáng)陽性()。WesternBlotting：33—46KD附近出現(xiàn)的特異性條帶為VEGF表達(dá)陽性。紫外凝膠成像及分析系統(tǒng)掃描，讀取并比較蛋白印跡灰度值。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：采用SPSSforwindowsl00統(tǒng)計(jì)分析軟件。