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1、從HCMV AD169中擴(kuò)增出pp65(1006-1521nt)抗原優(yōu)勢(shì)表位基因,分別克隆至原核和真核表達(dá)載體,制備了pp65蛋白質(zhì)疫苗和pp65 DNA疫苗;觀察其誘導(dǎo)Balb/c小鼠產(chǎn)生的體液免疫應(yīng)答和細(xì)胞免疫應(yīng)答,并對(duì)影響DNA免疫效果的因素進(jìn)行了初步探討和優(yōu)化;研究他們阻斷HCMV先天性感染的免疫保護(hù)程度.為預(yù)防母體原發(fā)性感染,阻止先天性HCMV感染尋找新的有效途徑.(一)成功構(gòu)建含pp65(1006-1521)目的片段原核和真
2、核重組表達(dá)載體,分別在BL21宿主菌和SP20細(xì)胞獲得表達(dá),具有免疫原性;(二)pp65蛋白質(zhì)疫苗、pp65 DNA疫苗、pp65蛋白質(zhì)疫苗+CpG、pp65 DNA疫苗初始/蛋白質(zhì)聯(lián)合加強(qiáng)均獲得不同程度的體液免疫和細(xì)胞免疫應(yīng)答,但以pp65蛋白質(zhì)疫苗+CpG、pp65 DNA疫苗初始/蛋白質(zhì)加強(qiáng)聯(lián)合疫苗獲得最強(qiáng)的體液免疫和細(xì)胞免疫應(yīng)答;(三)運(yùn)用HCMV先天性中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染SPF級(jí)小鼠模型評(píng)價(jià)pp65 DNA疫苗和pp65DNA疫苗
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