人巨細(xì)胞病毒pp65抗原檢測(cè)

1、人巨細(xì)胞病毒pp65抗原檢測(cè),監(jiān)測(cè)免疫抑制病人的CMV感染·,* 人巨細(xì)胞病毒（CMV）感染甚為普遍* 人巨細(xì)胞病毒（CMV）感染是免疫功能低下者的常見(jiàn)機(jī)會(huì)感染* 器官移植后活動(dòng)性HCMV感染率為20-70%，如發(fā)生CMV肺炎，死亡率可達(dá)80-90%* CMV還有抑制機(jī)體免疫功能的作用，CMV感染可增加真菌和其他機(jī)會(huì)感染發(fā)生率，* 還可能造成異基因移植物的損害。* 目前對(duì)器官移植后CMV病的重點(diǎn)是

2、預(yù)防，包括預(yù)防性抗病毒或針對(duì)CMV亞臨床感染(Preemptive)抗病毒治療治療。,,* 早期檢測(cè)活動(dòng)性HCMV感染是pre-emptive治療的前提條件* CMV常規(guī)病毒培養(yǎng)(CCC)往往需4周才能獲陽(yáng)性結(jié)果,對(duì)早期 診斷幫助不大* CMV特異性抗體IgM，在嚴(yán)重免疫抑制患者可不出現(xiàn)或延遲出現(xiàn)。* 人巨細(xì)胞病毒pp65白細(xì)胞抗原血癥較特異性抗體IgM陽(yáng)性早出現(xiàn)30天1。優(yōu)點(diǎn)是可定量檢測(cè)，5小時(shí)內(nèi)可出結(jié)果。,

3、研究目的 了解HCMVpp65抗原檢測(cè)在免疫功能低下者臨床HCMV疾病預(yù)測(cè)或早期診斷中的價(jià)值。 了解HCMVpp65抗原檢測(cè)在監(jiān)測(cè)疾病活動(dòng)性和指導(dǎo)CMV““亞臨床感染抗病毒”治療中的價(jià)值。 應(yīng)用HCMVpp65抗原檢測(cè)分析免疫抑制病人CMV感染的危險(xiǎn)因素,試驗(yàn)原理 用免疫熒光標(biāo)記的單克隆抗體檢測(cè)CMV的低基質(zhì)磷蛋白 pp65。 pp65的特點(diǎn) * CMV病毒復(fù)制

4、的早期蛋白，它出現(xiàn)于病毒感染的早期，在細(xì)胞感染后3－4小時(shí)即開始出現(xiàn) * 是CMV病毒含量最豐富的蛋白 * 其功能是將病毒的DNA錨定在受感染細(xì)胞的核膜上 * 在胞漿的高爾基體內(nèi)合成,然后運(yùn)回核內(nèi)。,CMV PP65抗原血癥檢測(cè)（一)分離白細(xì)胞及制片(二) 固定和打孔(三) 免疫熒光染色(四)、讀片和結(jié)果判斷,試驗(yàn)結(jié)果,討論 一pp65抗

5、原血癥檢測(cè) 直接檢測(cè)病毒蛋白的方法不受機(jī)體免疫功能的響，在檢測(cè)免疫抑制病人的CMV活動(dòng)性感染時(shí)尤其有用. 其檢出率明顯高于血清學(xué)方法 特點(diǎn)為快速（手工操作4-5小時(shí)）、敏感性高（活動(dòng)性感染80-90%，CMV病99-100%）和較高的特異性（77-95%）、可以定量測(cè)試 用其指導(dǎo)治療明顯降低了死亡率,在骨髓移植中，可在發(fā)病早期診斷，亞臨床感染的檢出率偏低，應(yīng)尋求更好的預(yù)測(cè)方法，或調(diào)整診斷標(biāo)準(zhǔn) 不能檢測(cè)

6、新毒株和抗原決定簇有變異的毒株 治療后抗原血癥轉(zhuǎn)陰的病人少部分會(huì)復(fù)發(fā)，應(yīng)結(jié)合更好的監(jiān)控療效的方法,,一PP65檢測(cè)在監(jiān)測(cè)骨髓移植后CMV感染中的應(yīng)用1 －－－早期診斷* 骨髓移植后早期用IGM來(lái)診斷CMV感染將貽誤治療* pp65抗原檢測(cè)可用于早期診斷，甚至預(yù)測(cè)發(fā)病* 如果能在骨髓重建的早期檢測(cè)到對(duì)CMV的細(xì)胞免疫或體液免疫異常或抑制則能更準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)CMV感染。,PP65檢

7、測(cè)在監(jiān)測(cè)骨髓移植后CMV感染中的應(yīng)用 2 － 骨髓移植后CMV感染的危險(xiǎn)因素 CD34＋細(xì)胞分選 GVHD(FK506) TBI 合并其他病原體感染,PP65檢測(cè)在監(jiān)測(cè)骨髓移植后CMV感染中的應(yīng)用3 －－治療時(shí)間 細(xì)胞數(shù)多者和少者癥狀性感染的發(fā)病率是相近的 90％的癥狀性感染首次陽(yáng)性抗原血癥的PP65陽(yáng)性細(xì)

8、胞數(shù) <10個(gè)/1.5×10?（1－7） 我們認(rèn)為這組病人只要發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性細(xì)胞即應(yīng)治療,,首次pp65抗原陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)與CMV疾病危險(xiǎn)性 首次pp65抗原陽(yáng)性細(xì)胞 發(fā)病/活動(dòng)性感染 計(jì)數(shù) 例數(shù) 1 1/1 2－3

9、 5/5 4－10 5/6 >10 2/2 由于病例數(shù)少，無(wú)法進(jìn)行COX‘S比例危險(xiǎn)性分析.,,,,PP65在監(jiān)測(cè)自身免疫病病人CMV感染中的應(yīng)用 發(fā)熱的自身免疫病病人出現(xiàn)CMV感染發(fā)病率和死亡率均很高，CMV感染可能

10、是重要的致病原 較之白細(xì)胞減少機(jī)體免疫狀態(tài)異常和這種異常未被有效控制，可能是病毒活動(dòng)性復(fù)制的更主要的原因 陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)多少可以幫助判斷和預(yù)測(cè)CMV癥狀性感染 CMV特異性IgM的陽(yáng)性檢出率非常低，,CMV感染的危險(xiǎn)因素 CMV感染組DRI評(píng)分大多>20 合并細(xì)菌或感染 病程長(zhǎng)、未正規(guī)治療的狼瘡,三 PP65檢測(cè)在監(jiān)測(cè)血液腫瘤化療后和再障病人中CMV感染中的應(yīng)用,發(fā)熱的血液腫瘤化療后和再障病出現(xiàn)C

11、MV感染發(fā)病率和死亡率均很高幼稚細(xì)胞多，分化程度低，無(wú)抗病毒作用或病毒 作用很弱，可能是病毒活動(dòng)性復(fù)制的更主要的原因 CMV特異性IgM的陽(yáng)性檢出率非常低 合并細(xì)菌或其他感染者CMV感染率高，感染可由多種炎癥因子觸發(fā),結(jié)論 人巨細(xì)胞病毒pp65白細(xì)胞抗原血癥檢測(cè)可作為免疫功能低下者活動(dòng)性CMV感染或HCMV疾病的預(yù)測(cè)指標(biāo) 骨髓移植后或激素沖擊/化療后發(fā)熱患者PP65抗原血癥出現(xiàn)開始抗病