熱休克蛋白90α(HSP90α)在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)及其意義.pdf

1、目的:肺癌是世界范圍內(nèi)最常見的惡性腫瘤,2002年全世界肺癌新發(fā)病例約135萬,死亡病例約118萬,其中非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lungcancer,NSCLC)約占肺癌病人總數(shù)的80％。隨著工業(yè)化進(jìn)展,肺癌的發(fā)病率逐年增高,大多數(shù)肺癌患者就診時(shí)已是中晚期,失去手術(shù)機(jī)會(huì),半數(shù)以上肺癌患者在治療過程中需接受放化綜合治療。盡管臨床上規(guī)范化治療的實(shí)施,但5年生存率仍僅為15％左右。因此,如何提高肺癌對(duì)放化療的敏感性,減少局

2、部復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、改善患者生存期是目前臨床急需解決的問題。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,人類逐漸認(rèn)識(shí)到肺癌的發(fā)生、發(fā)展是一個(gè)多基因調(diào)控的多階段發(fā)生過程。研究表明,腫瘤乏氧細(xì)胞的產(chǎn)生和存在使腫瘤對(duì)放化療的抗拒性增加,腫瘤更具有侵襲性,更易發(fā)生轉(zhuǎn)移。熱休克蛋白90(heat shock protein90,HSP90)和缺氧誘導(dǎo)因子1α(hypoxiainducible factor-1α,HIF-1α均在人體多種腫瘤中高表達(dá)。HSP90、HIF-

3、1α等乏氧應(yīng)答基因使腫瘤得以存活、增殖、轉(zhuǎn)移,與腫瘤免疫、多藥耐藥及癌癥患者的預(yù)后關(guān)系密切,對(duì)常規(guī)治療包括放療和化療藥物產(chǎn)生抗拒。
　　 本實(shí)驗(yàn)為研究HSP90α在非小細(xì)胞肺癌組織的表達(dá)及其與預(yù)后的關(guān)系,進(jìn)一步探討HSP90α和HIF-1α的關(guān)系,采用免疫組織化學(xué)(immunohi-stochemistry,IHC)S-P法檢測了50例接受單純放化綜合治療的NSCLC患者的癌組織蠟塊中的HSP90α和HIF-1α蛋白表達(dá),探討二

4、者的相互關(guān)系及其與肺癌臨床病理特征的關(guān)系,進(jìn)而觀察HSP90α與NSCLC預(yù)后的關(guān)系,為NSCLC基因治療新策略、新靶點(diǎn)的探索提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù),為非小細(xì)胞肺癌的臨床治療(尤其是個(gè)體化治療)提供更充分的理論依據(jù)及新的策略和途徑。
　　 方法:
　　 1.本研究所用標(biāo)本取自2007年11月至2010年10月在河北省人民醫(yī)院腫瘤科收治的有明確組織學(xué)病理診斷、非手術(shù)治療的非小細(xì)胞肺癌患者50例,該組病例均經(jīng)纖維支氣管鏡檢查或經(jīng)

5、皮肺穿刺取病理證實(shí)。TNM臨床分期采用AJCC/UICC分期標(biāo)準(zhǔn),其中Ⅰ期0例,Ⅱ期10例,Ⅲ期20例,Ⅳ期20例。將患者分為早期組(Ⅰ-Ⅱ期,10例)和中晚期組(Ⅲ-Ⅳ期,40例)。
　　 2.應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法(SP法),檢測50例肺癌組織蠟塊中HSP90α和HIF-1α蛋白的表達(dá)情況與肺癌患者臨床病理因素的關(guān)系,分析二者相互關(guān)系及其與NSCLC預(yù)后的關(guān)系。
　　 3.運(yùn)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行分析處理。計(jì)

6、數(shù)資料采用X2檢驗(yàn),以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;應(yīng)用Kaplan-Meier進(jìn)行生存分析,Log-rank進(jìn)行生存率的比較,以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn);采用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型進(jìn)行多因素分析,以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1.HSP90α在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)情況
　　 HSP90α在非小細(xì)胞肺癌組織中陽性表達(dá)主要見于癌細(xì)胞的細(xì)胞漿,少數(shù)定位于胞核,呈棕黃色顆粒狀,彌漫狀分布,

7、總陽性表達(dá)率為78％(39/50)。相關(guān)性檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn),HSP90α的陽性表達(dá)與臨床TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān),X2檢驗(yàn)顯示有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。HSP90α在中晚期(Ⅲ-Ⅳ)NSCLC組織中陽性表達(dá)率為87.5％(35/40),明顯高于在早期(Ⅰ-Ⅱ)NSCLC組織中的表達(dá)40％(4/10);HSP90α在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中陽性表達(dá)為87.8％(36/41),在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中表達(dá)率為33.3％(3/9)。HSP90α蛋白表達(dá)與

8、患者性別、年齡、腫瘤部位、腫瘤大小、腫瘤病理類型及分化程度差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 2.HIF-1α在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)情況
　　 HIF-1α在非小細(xì)胞肺癌組織中陽性表達(dá)主要見于癌細(xì)胞的胞細(xì)核,呈棕黃色,彌散或灶狀分布,總陽性表達(dá)率為62％(31/50)。相關(guān)性檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn),HIF-1α的陽性表達(dá)與臨床TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān),x2檢驗(yàn)顯示有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05),HIF-1α在Ⅲ-Ⅳ期NS

9、CLC組織中陽性表達(dá)率為72.5％(29/40),明顯高于Ⅰ-Ⅱ期肺癌組20％(2/10);HIF-1α在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中表達(dá)率為70.7％(29/41),在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移NSCLC中陽性表達(dá)率為22.2％(2/9)。HIF-1α蛋白表達(dá)與患者性別、年齡、腫瘤部位、腫瘤大小、腫瘤病理類型及分化程度均無顯著性差異(P＞0.05)。
　　 3.HSP90α和HIF-1α在NSCLC組織中表達(dá)的相關(guān)性
　　 HSP90α和HIF-

10、1α蛋白在NSCLC組織中的均表達(dá)例數(shù)為30例,關(guān)聯(lián)性檢驗(yàn)顯示,二者蛋白表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(Pearson列聯(lián)系數(shù)C=0.501,P=0.000)。30例患者中28例為中晚期,其中Ⅲ期11例,Ⅳ期17例。
　　 4.NSCLC放化療后生存率分析
　　 50例NSCLC患者治療后1、2、3年生存率分別為42.9％、18.8％、8％,中位生存期為11.0個(gè)月,平均生存期15.4個(gè)月;HSP90α蛋白表達(dá)陽性組和陰性組放化療后1

11、、2、3年生存率分別為71.8％、34.2％、3.1％和76.2％、45.7％、30.5％,Log-Rank檢驗(yàn)顯示兩組生存曲線差異有顯著性差異(P=0.009);HIF-1α蛋白表達(dá)陽性組和陰性組放化療后1、2、3年生存率分別為64.2％、7.7％、3.9％、和64.7％、40.4％、16.2％,Log-Rank檢驗(yàn)顯示兩組生存曲線差異有顯著性差異(P=0.015)。
　　 5.NSCLC預(yù)后相關(guān)因素分析
　　 單因素

12、分析顯示:淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、HSP90α和HIF-1α與非小細(xì)胞肺癌放化療后預(yù)后均有關(guān)(P＜0.05);患者性別、年齡、腫瘤生長部位、病理類型及腫瘤組織分化程度對(duì)非小細(xì)胞肺癌預(yù)后未見明顯影響(P＞0.05)。
　　 Cox回歸模型多因素分析顯示TNM臨床分期(B=1.925,P=0.002)和.HIF-1α(B=O.834,P=0.030)為NSCLC獨(dú)立預(yù)后危險(xiǎn)因素。
　　 結(jié)論:
　　 1.NSCLC組織

13、中HSP90α和HIF-1α蛋白均有高表達(dá);HSP90α、HIF-1α蛋白的表達(dá)均與NSCLC的TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān),提示臨床分期越晚,二者陽性表達(dá)越高。
　　 2.HSP90α和HIF-1α表達(dá)存在正相關(guān)性。
　　 3.HSP90α和HIF-1α蛋白表達(dá)陽性組生存率明顯低于陰性表達(dá)組。
　　 4.淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、HSP90α和HIF-1α蛋白表達(dá)與NSCLC預(yù)后均有關(guān);臨床TNM分期及HIF-1