測(cè)量和分析纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)的新方法.pdf

1、氣管中纖毛的運(yùn)動(dòng)活動(dòng)(CBA)通過清除呼吸道中的痰液和病原體扮演著重要的作用。因?yàn)槔w毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)極其復(fù)雜以至于不能僅僅通過頻率來描述其特征,所以我們用激光共聚焦顯微鏡的線掃模式記錄纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)并且定義了六個(gè)參數(shù)來反應(yīng)纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)。當(dāng)測(cè)量纖毛運(yùn)動(dòng)的小鼠纖毛細(xì)胞時(shí),這六個(gè)參數(shù)的值都大于零。
　　接下來我們用10微摩爾腺嘌呤核苷三磷酸刺激細(xì)胞,同時(shí)記錄細(xì)胞內(nèi)鈣水平和纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)。我們發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)鈣水平先增高,緊接著纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)增強(qiáng)。在這六個(gè)

2、參數(shù)之中,頻率、幅度和積分面積顯著增高,然而上升時(shí)間、下降時(shí)間和半數(shù)衰變時(shí)間明顯下降。這些結(jié)果表明六個(gè)參數(shù)適合評(píng)估纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)而且升高的細(xì)胞內(nèi)鈣水平可能增強(qiáng)纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)。
　　接下來我們用機(jī)械刺激纖毛尖端,并且用我們建立的方法觀察各個(gè)參數(shù)的變化。結(jié)果表明機(jī)械刺激介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)鈣水平和纖毛運(yùn)動(dòng)活動(dòng)的變化不僅和腺嘌呤核苷三磷酸引導(dǎo)的變化相似,而且這種變化可以被10微摩爾的鈣離子螯合劑BAPTA-AM處理十分鐘阻斷掉。此外,在無鈣條件下,