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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
基質(zhì)輔助激光解吸/電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(Matrix assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技術(shù)是一種軟電離新型有機(jī)質(zhì)譜,可在幾分鐘內(nèi)對(duì)不同種類的病原菌進(jìn)行鑒定,和以往病原菌鑒定方法相比,在鑒定速度上有了質(zhì)的突破。本研究利用MALDI-TOF MS與全自動(dòng)微生物生化鑒定儀Vitek2對(duì)本實(shí)驗(yàn)室69
2、0株病原菌進(jìn)行鑒定,以探討MALDI-TOF MS在病原菌鑒定診斷方面的優(yōu)勢(shì)與不足,為MALDI-TOF MS臨床應(yīng)用提供理論支持和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:
分離深圳市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室從2014年5月至2014年10月經(jīng)臨床標(biāo)本培養(yǎng)出的690株病原菌;挑取培養(yǎng)基中單個(gè)菌落進(jìn)行革蘭氏染色、觀察菌落形態(tài);采用Vitek MS和Vitek2對(duì)菌株進(jìn)行鑒定,Vitek MS與Vitek2鑒定結(jié)果不一致的菌株進(jìn)行16S r
3、RNA基因序列測(cè)定分析或ITS2基因序列測(cè)定分析;比較Vitek MS與Vitek2對(duì)各類病原菌鑒定到種、屬水平的準(zhǔn)確率。
結(jié)果:
分離培養(yǎng)的菌株經(jīng)涂片染色可初步鑒定為革蘭陰性菌的有356株,革蘭陽(yáng)性菌的有241株,類酵母菌有93株。經(jīng)Vitek MS與Vitek2對(duì)690株菌進(jìn)行鑒定,共568株細(xì)菌鑒定結(jié)果一致,其中包括革蘭陰性菌348株,革蘭陽(yáng)性菌220株;共有29株細(xì)菌兩種方法鑒定結(jié)果不一致;對(duì)93株類酵母菌進(jìn)
4、行鑒定,共有76株類酵母菌鑒定結(jié)果一致,17株類酵母菌鑒定結(jié)果不一致;對(duì)結(jié)果不一致細(xì)菌采用16S rRNA基因序列測(cè)定進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)這29株細(xì)菌中,Vitek MS屬水平上的準(zhǔn)確率為89.65%(26/29),種水平上的準(zhǔn)確率為72.41%(21/29),Vitek2屬水平上的準(zhǔn)確率為48.28%(14/29),種水平上的準(zhǔn)確率為6.90%(2/29),Vitek MS在屬水平及種水平的鑒定準(zhǔn)確率均顯著高于 Vitek MS(P<0.0
5、1);對(duì)結(jié)果不一致的類酵母菌采用ITS2基因序列測(cè)定分析,發(fā)現(xiàn)這17株類酵母菌中,Vitek MS的準(zhǔn)確率為100%(17/17),Vitek2為0%(0/17)。對(duì)93株類酵母菌鑒定Vitek MS的準(zhǔn)確率為100.00%(93/93),Vitek2準(zhǔn)確率為81.72%(76/93),Vitek MS對(duì)類酵母菌的鑒定準(zhǔn)確率顯著高于Vitek2(P<0.01)。
結(jié)論:
MALDI-TOF MS技術(shù)在病原菌鑒定中的準(zhǔn)
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