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文檔簡介
1、目的:通過檢測杜氏型肌營養(yǎng)不良(Duchenne muscular dystrophy, DMD)患者血清中基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、金屬蛋白酶組織抑制劑-1(TIMP-1)、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)的水平及腓腸肌中纖維化程度,探討血清MMP-9、TIMP-1、TGF-β1與DMD骨骼肌纖維化的關(guān)系。
方法:收集2011年1月至2012年6月就診于深圳市兒童醫(yī)院神經(jīng)肌肉病??频奈唇?jīng)藥物治療的DMD/BMD
2、患兒的腓腸肌組織及非抗凝血,正常兒童的非抗凝血。其中DMD組42例(6.55±2.72歲),BMD組8例(8.80±4.17歲),正常對照組18例(8.07±3.86歲)。DMD組又根據(jù)年齡分為3組,其中0~4歲組13例(3.48±0.28歲)、5~9歲組21例(6.83±0.94歲)、>9歲組8例(10.81±0.93歲)。對腓腸肌肌組織冰凍后保存。冰凍組織行HE染色觀察骨骼肌基本病理改變,Masson染色觀察骨骼肌纖維化程度,免疫組
3、織化學(xué)鏈霉素抗生物素蛋白過氧化物酶連結(jié)(SP)法觀察MMP-9、TIMP-1、TGF-β1在肌肉組織中的分布情況。非抗凝血行ELISA法測血清MMP-9、TIMP-1、TGF-β1濃度測定。
結(jié)果:(1)HE染色、Masson染色示:DMD組骨骼肌中可見纖維組織增生,其中0~4歲組DMD患者骨骼肌纖維組織增生不明顯,5~9歲組DMD骨骼肌纖維組織增生明顯,>9歲組DMD骨骼肌纖維組織增生明顯,且肌纖維數(shù)量明顯減少。BMD對
4、照組未見明顯纖維組織增生。(2)纖維化程度:DMD組纖維化程度比BMD組高(P<0.05)。在DMD患者中,0~4歲組、5~9歲組、>9歲組兩兩比較,纖維化程度均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),且纖維化程度與患兒年齡成正相關(guān)(r=0.694,P<0.05)。(3) MMP-9、TIMP-1、TGF-β1存在于DMD骨骼肌中,且在巨噬細(xì)胞浸潤的部位表達(dá)增強。在DMD骨骼肌中可見較多成纖維細(xì)胞。(4)血清MMP-9、TIMP-1、TGF-β1
5、濃度:DMD組、BMD對照組與正常對照組相比,血清MMP-9、TIMP-1、TGF-β1濃度均升高,且DMD組升高最明顯,三組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。(5)在DMD患者中,5~9歲組、>9歲組與0~4歲組相比,血清MMP-9濃度降低(P<0.05),5~9歲組與>9歲組相比,血清MMP-9濃度差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);DMD患者5~9歲組與0~4歲組、>9歲組相比,血清TIMP-1、TGF-β1濃度均升高(P<0
6、.05),0~4歲組與>9歲組相比,血清TIMP-1、TGF-β1濃度差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。(6)9歲前的DMD患者,血清MMP-9(r=0.6118,P<0.05)、TIMP-1(r=0.6086,P<0.05)、TGF-β1(r=0.6512,P<0.05)濃度分別與年齡成正相關(guān);>9歲DMD患者血清MMP-9(r=0.011,P>0.05)、TIMP-1(r=0.209,P>0.05)、TGF-β1(r=0.4588,
7、P>0.05)濃度與年齡無線性相關(guān)。
結(jié)論:(1) DMD患者骨骼肌纖維化程度隨年齡的增加而增加。(2) DMD患者與BMD患者、健康兒童比較,血清MMP-9、TIMP-1、TGF-β1濃度升高。(3)在DMD患者9歲之前,血清MMP-9、TIMP-1、TGF-β1濃度隨年齡的增加、纖維化程度的加重而升高。(4)血清MMP-9、TIMP-1、TGF-β1濃度在一定程度上反映了DMD病情變化,可能是評估DMD病情變化及DMD
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