巢式SCCA RT-PCR檢測食管癌外周血微轉(zhuǎn)移及其臨床意義.pdf

1、鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文巢式SCCARTPCR檢測食管癌外周血微轉(zhuǎn)移及其臨床意義姓名：郭濤申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師：王立東20060415郟卅l大學(xué)2t1()t；俑碩1學(xué)似嗆文巢止州c^mlqR檢測食管癌外川l仇微轉(zhuǎn)移及J‘臨床意義癌抗原(squamouscellcareinomaant遠(yuǎn)en，sccA)過度表達(dá)參與上皮源性惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移，盡管作為癌微轉(zhuǎn)移標(biāo)志物的特異性尚存在不一致的報道，SCCA參與癌微轉(zhuǎn)移的研究

2、已有較多報道。通過巢式逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)fnestedR1二Pc鼬擴(kuò)增腫瘤細(xì)胞特異性或組織特異性基因，能高度靈敏地從1X106一lxl0。7個細(xì)胞中檢測出一個腫瘤細(xì)胞，是目前檢測腫瘤隱匿微轉(zhuǎn)移的最有效方法之一。本實(shí)驗(yàn)旨在利用巢式逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)探討sccAmRNA作為診斷食管癌外周血微轉(zhuǎn)移的可行性及其臨床意義。材料與方法1病例選擇食管癌患者：30例手術(shù)治療食管癌患者均來自食管癌高發(fā)區(qū)林州市中心醫(yī)院(2004—2005年)，其中男性

3、18例(平均年齡599歲；年齡范圍在4373歲)，女性12例(平均年齡616歲；年齡范圍在53—70歲)，患者術(shù)前均未接受任何放療或化療。所有患者術(shù)后均進(jìn)行跟蹤隨訪，隨訪時間均在37周以上。術(shù)后73周內(nèi)死亡的5例患者死因均為腫瘤復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。正常對照組：20例健康受檢對象來自河南省林州地區(qū)食管癌普查人群。其中女性17例(平均年齡356歲；年齡范圍在2743歲)，男性3例(平均年齡335歲；年齡范圍在2849歲)。2外周血和手術(shù)切除標(biāo)本的采

4、集和處理30例食管癌患者均分別采集2次空腹外周靜脈血(每人每次5m1)(手術(shù)前3天和手術(shù)后10天)并收集每例食管癌手術(shù)切除標(biāo)本。20例健康受檢對象均采集5ml空腹外周靜脈血。所有血樣均現(xiàn)場分離有核細(xì)胞并液氮保存，再轉(zhuǎn)入實(shí)驗(yàn)室80℃冰箱備用。手術(shù)切除標(biāo)本按本室常規(guī)處理(一半固定，一半80℃保存)，固定組織進(jìn)行常規(guī)組織學(xué)處理，并進(jìn)行病理學(xué)診斷和TNM分期(1987)。冰凍組織進(jìn)行冰凍切片，HE染色以備RNA提取。3sccAl免疫組化檢測采用