多重耐藥鮑曼不動桿菌耐藥基因及分子流行病學(xué)研究.pdf

1、鮑曼不動桿菌是一類非發(fā)酵的革蘭陰性桿菌，為條件致病菌。廣泛存在于水、土壤、醫(yī)院環(huán)境和人體皮膚表面，是醫(yī)院感染的重要致病菌之一，主要引起獲得性肺炎特別是呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎、菌血癥、尿路感染、繼發(fā)性腦膜炎等。隨著廣譜抗菌藥物和免疫抑制劑大量使用，對常用的β-內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類、氟喹諾酮類等抗菌藥物同時耐藥的多重耐藥鮑曼不動桿菌分離率明顯增多，并在醫(yī)院內(nèi)廣泛流行，給臨床抗感染治療帶來極大的麻煩，同時對醫(yī)院感染控制提出了新的挑戰(zhàn)。對多重耐藥鮑曼

2、不動桿菌(Multi-drug resistant Acinetobacter baumanniiMDRAB)的藥敏試驗和醫(yī)院科室分布情況進(jìn)行統(tǒng)計和分析，并檢測相關(guān)耐藥基因和對菌株進(jìn)行同源性分析，從而指導(dǎo)醫(yī)生合理使用抗菌藥物，探討我院多重耐藥鮑曼不動桿菌產(chǎn)生的耐藥機(jī)制，為我院預(yù)防與控制院內(nèi)感染提供理論依據(jù)，給流行病學(xué)研究奠定基礎(chǔ)。
　　本研究收集四川醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院2013年9月至2014年9月臨床分離的62株非重復(fù)多重耐藥鮑

3、曼不動桿菌。利用MicroScan WalkAway96 Plus全自動微生物鑒定/藥敏測試系統(tǒng)進(jìn)行鑒定、驗證，瓊脂稀釋法檢測菌株對23種抗生素的最低抑菌濃度(MIC)，利用聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction，PCR)檢測菌株的6種相關(guān)耐藥基因(TEM、SHV、VIM、IMP、OXA-23、OXA-24)的攜帶情況，將擴(kuò)增所得的陽性產(chǎn)物送上海鉑尚生物技術(shù)有限公司測序，將測序所得序列和GenBank數(shù)據(jù)庫進(jìn)行

4、對比分析，并采用脈沖場凝膠電泳(Pulsed Field Gel Electrophoresis，PFGE)對62株多重耐藥鮑曼不動桿菌進(jìn)行分子分型并分析其同源性。
　　結(jié)果顯示:62株多重耐藥鮑曼不動桿菌主要分離于痰液，其中40株分離于痰液標(biāo)本，11株分離于分泌物，其余為分離于血液標(biāo)本4株、中段尿標(biāo)本3株、腦脊液標(biāo)本2株和胸水標(biāo)本2株。臨床科室分布分別是重癥監(jiān)護(hù)室24株，呼吸內(nèi)科10株，神經(jīng)外科8株，余下菌株來源于其他臨床科室。

5、62株多重耐藥鮑曼不動桿菌對青霉素類的耐藥率均為100％;對頭孢菌素中頭孢曲松鈉耐藥率為96.8％，其余均為100％。對氨芐西林/舒巴坦的耐藥率為80.6％，對碳青霉烯類抗生素中亞胺培南和美羅培南的耐藥率為90.3％和88.7％，對氨基糖苷類抗生素中慶大霉素、阿米卡星、妥布霉素的耐藥率分別為93.5％、80.6％和53.2％，對喹諾酮類抗生素中環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、加替沙星的耐藥率分別為100％、85.5％和64.5％，對多粘菌素和多粘

6、菌素B的耐藥率為12.9％和11.3％。對四環(huán)素、米諾環(huán)素、替加環(huán)素的耐藥率分別為90.3％、17.7％、3.2％。對磺胺甲惡唑和利福平的耐藥率為69.4％和92％。6種耐藥基因共檢出4種，其中TEM陽性有52株，陽性率為83.9％，VIM陽性有53株，陽性率為85.5％，IMP陽性有41株，陽性率為66.1％，OXA-23陽性有58株，陽性率為93.5％。4種耐藥基因陽性擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)測序后與GenBank中已提交的相應(yīng)基因序列的同源性為

7、98％-100％。PFGE將62株多重耐藥鮑曼不動桿菌分為4型，A型和B型為主要克隆株。A型包括4個亞型共32株，B型有2個亞型共19株，C克隆有8株。D克隆有3株。
　　以上研究表明我院分離的多重耐藥鮑曼不動桿菌主要分布在呼吸內(nèi)科、重癥監(jiān)護(hù)室、神經(jīng)外科，呼吸道感染在感染病例中為主，與接受各種侵襲性操作有關(guān)。多重耐藥鮑曼不動桿菌的耐藥情況十分嚴(yán)峻，62株耐藥菌株對23種抗生素的耐藥水平高于全國細(xì)菌耐藥監(jiān)測網(wǎng)的水平。OXA-23在6

8、2株多重耐藥鮑曼不動桿菌中的攜帶率最高，為93.5％。并且攜帶VIM、TEM、IMP菌株也高達(dá)85.5％、83.9％、66.1％，說明攜帶多種耐藥基因是在多重耐藥鮑曼不動桿菌的中十分普遍。
　　我院鮑曼不動桿菌PFGE分型分為4型，以A型為主，共有32株占51.6％，主要在重癥監(jiān)護(hù)室、呼吸內(nèi)科、神經(jīng)外科、骨科、血液科5個病區(qū)流行，其次為B型，主要集中在呼吸內(nèi)科、重癥監(jiān)護(hù)室和兒科。多重耐藥鮑曼不動桿菌在我院各臨床科室廣泛分布并流行傳