香菇多糖硫酸酯的制備純化、鑒定及生物學(xué)活性的研究.pdf

1、香菇多糖具有提高免疫能力、抗病毒、抗腫瘤等生物學(xué)活性，在臨床上得到廣泛的應(yīng)用。近年來(lái)香菇多糖硫酸酯由于具有良好的抗病毒作用，從而受到人們的關(guān)注。目前，對(duì)香菇多糖硫酸酯的研究主要集中于其抗病毒活性，而對(duì)其抗腫瘤作用未見詳細(xì)報(bào)道。 本實(shí)驗(yàn)主要對(duì)硫酸酯化、理化性質(zhì)及生物學(xué)活性三部分內(nèi)容進(jìn)行了研究。在酯化工藝方面對(duì)氯磺酸—吡啶法加以改進(jìn)，采用逐步升溫的條件合成香菇多糖硫酸酯。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，吡啶和氯磺酸比例6:1，反應(yīng)溫度在65～90℃，

2、反應(yīng)時(shí)間為1.5～2h，得到了取代度較高的衍生物；以離子交換DEAE-52柱層析，分子篩SephadexG-75、SephadexG-100柱層析對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行了分離純化，得到分子量不同的兩個(gè)組分LNTS1和LNTS2；由于LNTS1含量極高且水溶性好，我們選取其進(jìn)行分離純化及進(jìn)行進(jìn)一步研究。通過離心凍融及瓊脂糖凝膠電泳鑒定了樣品LNTS1的純度，通過紫外光譜學(xué)和紅外光譜學(xué)分析及硫酸鋇比濁法，對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行硫酸基鑒定和結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果顯示，經(jīng)過硫

3、酸化，香菇多糖帶上硫酸基團(tuán)，取代度為0.86；由于酯化的影響，香菇多糖改變了構(gòu)象及溶解度等理化性質(zhì)。通過高效凝膠示差色譜測(cè)定，我們得到的香菇多糖硫酸酯的重均分子量為8.2678萬(wàn)，分子量分布寬度為1.5855；經(jīng)過硫酸化，香菇多糖的分子量分布變窄，分子量較為均一和集中。在生物學(xué)活性方面，檢測(cè)了香菇多糖和硫酸酯清除超氧陰離子、羥自由基的活性，并研究了其對(duì)體外培養(yǎng)的人宮頸癌細(xì)胞HeLa、人白血病細(xì)胞U937、人白血病細(xì)胞K562和人肝癌細(xì)胞