可口革囊星蟲功能成分的研究.pdf

1、南京農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文可口革囊星蟲功能成分的研究姓名：蘇秀榕申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：食品科學(xué)指導(dǎo)教師：胡秋輝20080601博士學(xué)位論文：可口革囊星蟲功能成分的研究多不飽和脂肪酸總含量為025mg／ml，約占脂肪酸總量的3652％。結(jié)果證明星蟲是一種高蛋白、低脂肪、無機(jī)元素豐富、食用較安全的海洋生物。其次，通過正交實(shí)驗(yàn)確定了利用酶法提取膠原蛋白的條件是：4“C，底物濃度1％，05mol／L醋酸(pH=1720)，酶濃度2％，水解時間7

2、2h；提取液中直接加入NaCl溶液鹽析沉淀膠原蛋白，透析除鹽，真空冷凍干燥得到成品。醋酸、檸檬酸、鹽酸可提取星蟲體壁膠原蛋白，但比較之后以05mol／L醋酸提取的膠原蛋白效果最佳。星蟲體壁膠原蛋白為I型，由a、13、丫三亞基構(gòu)成。紅外光譜檢測中，在1651cnlt附近出現(xiàn)了較強(qiáng)的羰基(C=0)吸收峰，在1235cm11450cm“1范圍內(nèi)存在(NH)吸收峰。在星蟲體壁膠原蛋白的氨基酸組成中，1／3是甘氨酸，蛋氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、組氨

3、酸等含量很少，脯氨酸和羥脯氨酸的總量所占比例為208／1000；星蟲的膠原蛋白可以形成中空膜狀結(jié)構(gòu)，納米顆粒較均勻，是最好的藥物載體。該膠原蛋白溶液的粘度隨濃度的增大而增大，隨著溫度的升高而下降；酸性條件下，粘度總體呈下降趨勢，堿性時粘度變化不大，而外加中低濃度的電解質(zhì)與非電解質(zhì)對膠原蛋白溶液粘度的影響并不顯著。星蟲膠原蛋白對小鼠皮膚無致敏反應(yīng)，對創(chuàng)面愈合有明顯的促進(jìn)作用，說明所提取的膠原蛋白不僅可以應(yīng)用于食品與化妝品行業(yè)，還可以進(jìn)一步

4、應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)材料等高附加值領(lǐng)域。最后，構(gòu)建了可口革囊星蟲的cDNA文庫，文庫的插入片段集中分布于7502000bp，平均大小均在1000bp。擴(kuò)增丈庫的滴度約為17x105cfu／ml。星蟲是位數(shù)不多含血紅蛋白的低等無脊椎動物，克隆出的蚯蚓血紅蛋白基因與邱米管體星蟲(SiphonosomacumanenseKeferstein)、普通戈芬星蟲(GolfingiavulgarisdeBlainville)、光裸方格星蟲(Sipuncul

5、usnudusL)、古氏仿革囊星蟲(PhascolopsisgouldiiPourtales)、異常枝觸星蟲(Themistedyscritum)等五種星蟲的氧基酸序列同源性分別為67％，50％，62％，45％，47％，氨基酸序列相似性分別為73％，65％，73％，59％，62％。也克隆出了832bp的膠原蛋白基因。從可口革囊星蟲文庫調(diào)出的ferritin基因與皺紋盤鮑等軟體動物、刺參等棘皮動物的ferritin基因的核苷酸序列同源性在