黃連上清丸的藥代動力學(xué)及血清藥物化學(xué)研究.pdf

1、黃連上清丸是由黃連、黃芩、黃柏、大黃等十七種藥材制成的中藥復(fù)方制劑，收錄于《國家基本中成藥》及2010版中華人民共和國藥典，具有清熱、止痛等作用，至今已沿用近500年。但其體內(nèi)藥動學(xué)行為及作用物質(zhì)基礎(chǔ)仍不明確，且未見關(guān)于黃連上清丸藥代動力學(xué)及血清藥物化學(xué)研究的任何報道。本論文同時對黃連上清丸中蘆薈大黃素和大黃酸進行了含量測定，用以評價市場上黃連上清丸的質(zhì)量，并首次對其進行了大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)及血清藥物化學(xué)研究，有助于闡明作用機制，明確

2、藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。
　　1、建立了一種新的HPLC法同時測定黃連上清丸中蘆薈大黃素及大黃酸的含量，并將其應(yīng)用于不同廠家不同批次的產(chǎn)品。色譜柱為Inertsil?ODS-3(4.6mm×150mm,5μm)，流動相為甲醇-0.2％磷酸（65:35），流速1.0ml/min，檢測波長254nm，柱溫25℃，進樣量10μl。此條件下，蘆薈大黃素、大黃酸在8.14-41.40μg/ml（r=0.9999）、6.49-29.70μg/ml（r=

3、0.9998）濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。且方法專屬性、重復(fù)性、儀器精密度、加樣回收率、穩(wěn)定性均符合測定要求。結(jié)果顯示部分不同廠家及同一廠家不同批號間黃連上清丸中蘆薈大黃素和大黃酸的含量有明顯上下浮動趨勢。
　　2、首次建立了HPLC-DAD法測定黃連上清丸中大黃酸在大鼠血漿中的濃度，并研究其藥動學(xué)過程。色譜柱為Inertsil?ODS-3(150mm×4.6mm,5um)，流動相為甲醇-0.2%磷酸（80:20）。內(nèi)標(biāo)為1，8-二羥

4、基蒽醌。檢測波長254nm，流速1.0ml/min，柱溫25℃，進樣量10μl。結(jié)果表明，在0.05-5μg/ml血藥濃度范圍內(nèi)，大黃酸呈良好的線性關(guān)系（r=0.9981）。高、中、低濃度下，日內(nèi)精密度均小于11.9%，日間精密度均小于14.7%；提取回收率為86.5%-106.3%。一定濃度下，內(nèi)標(biāo)提取回收率為91.2%。RSD均小于15%。藥動學(xué)結(jié)果顯示，一定劑量下，黃連上清丸中大黃酸在體內(nèi)呈二室開放模型，達峰時間為0.222h，達

5、峰濃度為0.219μg/ml。
　　3、首次利用LC-Q-TOF/MS技術(shù)對黃連上清丸進行血清藥物化學(xué)研究。體外檢測到黃連上清丸中46個化學(xué)成分，鑒定了其中27個，比較給藥前后大鼠血清MS及MS/MS圖，及其與體外化學(xué)成分的差異。尋找到來源于黃連上清丸的原型成分15個，鑒定了其中10個，發(fā)現(xiàn)代謝產(chǎn)物21個，鑒定了其中8個。結(jié)果顯示黃連上清丸主要有效成分小檗堿、大黃酸、黃芩苷、大黃素等均以原型入血，部分地揭示了黃連上清丸的藥效物質(zhì)基