玉米幼芽提取物對小鼠皮膚膠原蛋白氧化損傷的保護作用及其機制.pdf

1、目的：在H<,2>O<,2>和UVA所致氧化損傷條件下，研究玉米幼芽提取物(EMP)對小鼠皮膚組織及小鼠皮膚成纖維細胞膠原合成的影響，來探究其對皮膚氧化損傷的保護作用及其機制。 方法：分離并培養(yǎng)小鼠皮膚成纖維細胞，建立H<,2>O<,2>和UVA致小鼠皮膚和小鼠皮膚成纖維細胞氧化損傷模型。試驗設(shè)計分為4組：空白對照組、損傷模型組、0501號EMP保護組和0502號EMP保護組。生化法測定小鼠皮膚中羥脯氨酸含量，HE染色觀察小鼠皮

2、膚組織結(jié)構(gòu)變化，組織塊法分離培養(yǎng)小鼠皮膚成纖維細胞，MTT法測定體外培養(yǎng)小鼠皮膚成纖維細胞生長曲線，MTT法測定EMP對H<,2>O<,2>和UVA處理的小鼠皮膚成纖維細胞的生長活性的影響，RT-PCR法測定小鼠皮膚和小鼠皮膚成纖維細胞中Ⅰ、Ⅲ型前膠原及MMP-1、MMP-3 mRNA的相對表達量。 結(jié)果：在H<,2>O<,2>致氧化損傷狀態(tài)下，0501號EMP對小鼠皮膚組織結(jié)構(gòu)具有較好的保護作用，0502號EMP對小鼠皮膚組織

3、結(jié)構(gòu)也有一定的保護作用，但效果沒有0501號強；0501號EMP保護組和0502號EMP保護組小鼠皮膚中羥脯氨酸的含量分別是H<,2>O<,2>損傷組的3.9倍(P<0.01)和2倍(P<0.01)：MTT法測定小鼠皮膚成纖維細胞的活性顯示，0501號EMP保護組和0502號EMP保護組吸光值分別是H<,2>O<,2>損傷組的1.6倍(P<0.01)和1.5倍(P<0.01)；0501號EMP保護組和0502號EMP保護組小鼠皮膚中Ⅰ型

4、前膠原mRNA的表達分別是H<,2>O<,2>損傷組的2.4倍(P<0.01)和1.4倍(P<0.01)，Ⅲ型前膠原mRNA的表達分別是H<,2>O<,2>損傷組的15.4倍(P<0.01)和7倍(P<0.01)，MMP-1 mRNA的表達比H<,2>O<,2>損傷組分別下降37.1％(P<0.01)和16.2％(P<0.01)，MMP-3 mRNA的表達比H<,2>O<,2>損傷組分別下降20.8％(P<0.01)和13.8％(P<0

5、.01)；0501號EMP保護組和0502號EMP保護組小鼠皮膚成纖維細胞中Ⅰ型前膠原mRNA的表達分別是H<,2>O<,2>損傷組的3.5倍(P<0.01)和1.8倍，Ⅲ型前膠原mRNA的表達分別是H<,2>O<,2>損傷組的4.6倍(P<0.01)和3倍(P<0.01)，MMP-1 mRNA的表達比H<,2>O<,2>損傷組分別下降20.6％(P<0.01)和16.9％(P<0.01)，MMP-3 mRNA的表達比H<,2>O<,2

6、>損傷組分別下降41.3％(P<0.01)和15％(P<0.01)。在IJVA致氧化損傷狀態(tài)下，0501號EMP對小鼠皮膚組織結(jié)構(gòu)具有較好的保護作用，0502號EMP對小鼠皮膚組織結(jié)構(gòu)有部分保護作用；0501號EMP保護組和0502號EMP保護組小鼠皮膚中羥脯氨酸的含量分別是UVA損傷組的2.3倍(P<0.01)和1.8倍(P<0.01)；MTT法檢測顯示UVA照射小鼠皮膚成纖維細胞并未引起細胞活性改變；0501號EMP保護組和0502

7、號EMP保護組小鼠皮膚中Ⅰ型前膠原mRNA的表達分別是UVA損傷組的2倍(P<0.01)和1.75倍(P<0.01)，Ⅲ型前膠原mRNA的表達分別比UVA損傷組下降39.8％(P<0.01)和28.8％(P<0.01)，MMP-1 mRNA的表達比UVA損傷組分別下降29.5％(P<0.01)和9.3％(P<0.01)，MMP-3mRNA的表達比UVA損傷組分別下降43.3％(P<0.01)和19％(P<0.01)；0501號EMP保護

8、組和0502號EMP保護組小鼠皮膚成纖維細胞中Ⅰ型前膠原mRNA的表達分別是UVA損傷組的3倍(P<0.01)和2.4倍(P<0.01)，Ⅲ型前膠原mRNA的表達分別是UVA損傷組的1.2倍(P<0.01)和1.1倍(P<0.01)，MMP-1 mRNA的表達比UVA損傷組分別下降53.6％(P<0.01)和43.2％(P<0.01)，MMP-3 mRNA的表達比UVA損傷組分別下降32.3％(P<0.01)和15.6％(P<0.01)

9、。 結(jié)論：玉米幼芽提取物能提高體外培養(yǎng)小鼠皮膚成纖維細胞活性，抑制自由基對小鼠皮膚成纖維細胞膜相結(jié)構(gòu)的損傷，抑制自由基對羥基化酶的損傷作用，提高羥脯氨酸的含量，促進膠原蛋白的基因表達，抑制基質(zhì)金屬蛋白酶的基因表達，保護皮膚組織中成纖維細胞免受氧化損傷從而維持皮膚組織的正常結(jié)構(gòu)。其機制與玉米幼芽提取物能夠清除自由基，保護細胞膜相結(jié)構(gòu)，保護細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的正常功能，抑制自由基對DNA的損傷，影響基因表達活性有關(guān)。其中0501號玉米幼芽