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文檔簡介
1、硒是動物機(jī)體必需的微量元素,以硒代半胱氨酸的形式插入到硒蛋白發(fā)揮生物學(xué)作用,尤其是在腦生物學(xué)功能方面具有重要意義。硒代半胱氨酸合成酶(SepSecS)在硒氨酸的合成與轉(zhuǎn)化中發(fā)揮至關(guān)重要的作用,并通過硒蛋白合成調(diào)控在硒生物學(xué)功能中扮演重要角色,但其在硒對雞神經(jīng)細(xì)胞中硒蛋白轉(zhuǎn)錄組的調(diào)控作用仍不清楚。本試驗(yàn)給雞飼喂硒缺乏和富硒飼料,檢測雞不同腦組織中硒蛋白轉(zhuǎn)錄組水平,并利用RNA干擾技術(shù)建立雞神經(jīng)元SepSecS基因沉默模型,觀察SepSec
2、S在硒調(diào)控硒蛋白轉(zhuǎn)錄組中作用,結(jié)果表明:
1.利用生物信息學(xué)分析SepSecS的結(jié)構(gòu)與功能,顯示該蛋白能夠與PLP,PO4,SEP結(jié)合發(fā)揮硒代半胱氨酸合成功能;同時(shí)以抗原性好的合成多肽作為免疫原,成功制備了兔抗雞SepSecS多克隆抗體;利用制備的多克隆抗體檢測雞中樞神經(jīng)系統(tǒng)SepSecS蛋白的表達(dá)譜分布,丘腦>大腦>脊髓>嗅球>小腦。
2.飼料硒水平能夠調(diào)節(jié)雞不同腦區(qū)中硒蛋白合成相關(guān)因子的表達(dá),富硒顯著增加雞不同腦
3、區(qū)SepSecS表達(dá)水平;體外培養(yǎng)雞胚神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)SepSecS蛋白及mRNA表達(dá)水平能夠被硒提高。
3.飼料硒水平對雞不同腦區(qū)硒蛋白表達(dá)譜具有調(diào)節(jié)作用,發(fā)現(xiàn)Selt,Selk,Selu,Selw,Gpx3,Gpx4,Sepp1,Selo,Sel15,Selm,Gpx2和Sepp2在神經(jīng)系統(tǒng)中的表達(dá)隨硒含量變化敏感;硒能夠影響雞胚神經(jīng)元硒蛋白組轉(zhuǎn)錄,Selt,Sel15,Selu,Gpx3,Selk,Selw,Gpx4,Sep
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