2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩72頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、目的:SUMO化是近年來發(fā)現(xiàn)的一種新的蛋白質(zhì)翻譯后修飾方式。研究發(fā)現(xiàn),在不同的刺激下,突觸前膜蛋白SUMO化水平會(huì)發(fā)生不同的改變,通過調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)的釋放,影響突觸可塑性;SUMO化是否參與了突觸可塑性,以及在突觸可塑性中發(fā)生SUMO化的靶蛋白和它們的作用機(jī)制尚不明確。Akt1是Akt家族的成員之一,是突觸可塑性中的廣泛作用蛋白,研究發(fā)現(xiàn)Akt1參與了海馬突觸長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)(long-term potentiation, LTP)的調(diào)控,但是

2、Akt1在突觸可塑性中的具體作用機(jī)制目前仍未闡明。本課題旨在研究Akt1 SUMO化對(duì)LTP的調(diào)控及Akt1 SUMO化對(duì)Akt1活性的調(diào)節(jié),進(jìn)而揭示Akt1在突觸可塑性中的作用機(jī)制。
  方法:采用Bicuculline刺激皮質(zhì)神經(jīng)元建立化學(xué)LTP細(xì)胞模型來研究Akt1SUMO化在突觸可塑性中的作用;Bicuculline作用前30 min分別給以NMDA受體的不可逆抑制劑MK801、NMDA受體亞基GluN2A的特異性抑制劑N

3、VP-AMM077(NVP)、GluN2B的特異性抑制劑Ro25-6981(Ro)抑制其活性,來研究NMDA受體對(duì)Akt1 SUMO化的調(diào)控;采用體外激酶反應(yīng)來研究SUMO化對(duì)Akt1活性的影響;采用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)構(gòu)建Akt1 SUMO化位點(diǎn)的突變體,鑒定Akt1的SUMO化位點(diǎn);采用免疫印跡、免疫共沉淀方法來研究Akt1 SUMO化、蛋白的表達(dá)及PIASs與Akt1的相互作用。
  結(jié)果:1.Akt1可與SUMO1共價(jià)結(jié)合。

4、2.Bicuculline誘導(dǎo)LTP后,Akt1 SUMO化水平呈上升的趨勢(shì),在12 h達(dá)到最高,達(dá)到對(duì)照組的3倍。3.LTP組中PIAS1-Akt1,PIAS2-Akt1,PIAS3-Akt1相互作用較對(duì)照組都有明顯的升高。4.MK801、NVP組Akt1 SUMO化水平與Bicuculline組相比顯著降低,Ro組Akt1SUMO化水平與Bicuculline組相比無明顯差別。5.Myc-Akt1(WT)及Myc-Akt1(K64R

5、, K182R, K189R, K276R, K64+276R)真核表達(dá)載體成功構(gòu)建。6.共表達(dá)Myc-Akt1與有活性的SUMO1組Akt1 SUMO化水平明顯高于空細(xì)胞組、單轉(zhuǎn)Myc-Akt1組及Myc-Akt1與失活SUMO1共表達(dá)組。7.突變體Akt1(K64R,276R)SUMO化水平與WT組相比有顯著降低,突變體Akt1(K182R, K189R)的SUMO化水平與WT組相比無顯著變化。Akt1的雙賴氨酸突變體Akt1(K6

6、4+276R)SUMO化水平與WT組及Akt1(K64R)組、Akt1(K276R)組相比都有顯著的降低。8.體外激酶反應(yīng)結(jié)果顯示Akt1(K64+276R)組Akt1活性顯著低于WT組。9.Akt1(K64+276R)組Ser473磷酸化水平與WT組相比無顯著差別而Thr308磷酸化水平則有顯著降低。10.BDNF在K64+276R組中的表達(dá)較WT組有顯著的降低。
  結(jié)論:1.LTP促進(jìn)Akt1 SUMO化。2.NMDA受體亞

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論