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1、全文由兩部分組成.第一部分,在乳酸乳球菌中建立偏嗜密碼子編碼的apidaecin融合表達(dá)體系,該實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)以泛素(ubiquitin)融合蛋白的形式在乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)中表達(dá)了apidaecin.表達(dá)產(chǎn)物的產(chǎn)量可占宿主菌可溶性蛋白的7.2﹪.為了進(jìn)一步提高產(chǎn)量,達(dá)到工業(yè)化生產(chǎn)的要求,該研究根據(jù)乳酸乳球菌的密碼子偏嗜性,對原來的apidaecin基因進(jìn)行了改造.同時(shí),我們還對誘導(dǎo)時(shí)間,誘導(dǎo)物濃度和培養(yǎng)基的成
2、分對泛素和apidacin融合蛋白表達(dá)量的影響進(jìn)行了研究.第二部分,克隆泛素特異性蛋白酶(YUH1)的基因.YHU1是來源于釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的一種泛素特異性蛋白酶.它可以特異性的水解泛素C-末端最后一個(gè)甘氨酸與除脯氨酸之外的任何一個(gè)氨基酸形成的肽鍵.ubiquitin-apidaecin融合蛋白不具備抗菌活性.為了能夠去除泛素,得到有活性的apidaecin,該研究從酵母中克隆了YUH1基因,
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