牽張激活性離子通道對正常大鼠心室電生理和IE基因表達的影響.pdf

1、第一部分:目的:心臟機械電反饋是指對心臟的機械刺激會導致心臟電生理特性的改變.該實驗制備離體心臟灌流模型,觀察急性牽張左室對離體心臟電生理的作用.運用牽張激活性離子通道阻斷劑——鏈霉素來研究牽張激活性離子通道對離體心臟電生理改變的影響,揭示牽張激活性離子通道在心臟機械電反饋中的作用.方法:該實驗分為三組:不牽張組、牽張無鏈霉素組及牽張加鏈霉素組.離體灌流大鼠心臟的同時,將一自制乳膠球囊經(jīng)左心耳置入左心室.急性膨脹球囊牽張左室,記錄并分析

2、實驗各組心律失常的出現(xiàn)頻率和種類.結(jié)論:鏈霉素作為牽張激活性離子通道阻斷劑,能明顯減少急性膨脹心室所致心律失常的發(fā)生,提示牽張激活性離子通道在急性膨脹心室致心律失常的發(fā)生中發(fā)揮重要作用.但鏈霉素并不能完全消除心律失常,這也間接提示除牽張激活性離子通道外,牽張刺激還可能通過其他途徑致心律失常發(fā)生.第二部分:目的:胞外刺激導致原癌基因c-los的早期激活與表達,是細胞肥大的重要始動機制和特征性標志.離體灌流大鼠心臟的同時持續(xù)牽張左心室,研究

3、牽張對原癌基因c-fos mRNA及蛋白水平表達的影響,揭示機械牽張致心肌細胞肥厚發(fā)生的分子機制.方法:離體灌流大鼠心臟的同時,將一自制乳膠球囊經(jīng)左心耳置入左心室.膨脹球囊持續(xù)牽張左心室30分鐘后,停止灌流迅速剪下左心室,一部分用以抽提組織總RNA,通過逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應技術(shù),并以β-actin為內(nèi)參照,揭示持續(xù)牽張對c-los mRNA表達水平的影響;另一部分心室行免疫組化染色,探討牽張對c-los蛋白表達的影響.結(jié)論:鏈霉素作為牽