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1、鹽酸關(guān)附甲素對豚鼠和大鼠心室肌細(xì)胞的電生理作用 目的:研究鹽酸關(guān)附甲素(GuanfuBaseA,GFA)對分離的單個豚鼠心室肌細(xì)胞鈉通道電流(INa)延遲整流鉀電流(IK)、大鼠心室肌細(xì)胞內(nèi)向整流鉀電流(IK1)、瞬時外向鉀電流(Ito)的影響,旨在探討其抗心律失常機(jī)制。 方法:應(yīng)用急性酶解法分離獲得單個豚鼠和大鼠心室肌細(xì)胞,用標(biāo)準(zhǔn)的全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)記錄離子通道電流,觀察不同濃度的GFA對豚鼠心室肌細(xì)胞INa、IK及大鼠
2、心室肌細(xì)胞IK1、Ito的影響。 結(jié)果:(1)在測試電壓-20mV的條件下,50,150,500,750μmol/LGFA濃度依賴性抑制INa,使INa峰值電流密度與用藥前比較分別降低了24.24±2.78%、42.84±1.39%、61.23±1.34%、100±0%,各濃度用藥前后對比均達(dá)到統(tǒng)計學(xué)差異,P<0.05,其半數(shù)抑制濃度(50%inhibitoryconcentration,IC50)為184.38μmol/L;1
3、50μmol/LGFA使INa的電流密度-電壓曲線(I-V)上移,但不改變其激活、峰值和反轉(zhuǎn)電位,不影響INa的穩(wěn)態(tài)激活曲線;150μmol/LGFA使INa的穩(wěn)態(tài)失活曲線左移,即向更負(fù)的方向移動;150μmol/LGFA使INa的失活后恢復(fù)曲線右移,明顯減慢鈉通道滅活后恢復(fù)過程;150μmol/LGFA抑制INa電流呈使用依賴性。(2)在測試電壓+50mV的條件下,50,150,500μmol/LGFA使IKs尾電流(IKs,tail
4、)最大峰值電流密度與用藥前比較分別降低了11.4±3.32%、23.3±7.36%、36.7±4.99%,各濃度用藥前后對比均達(dá)到統(tǒng)計學(xué)差異,P<0.05;150μmol/LGFA對不同去極化時間激活的IK,tail均有抑制作用,且抑制率基本相同。(3)在測試電壓-100mV的條件下,50,150,500μmol/LGFA使IK1穩(wěn)態(tài)電流密度與用藥前比較分別降低了5.1±0.6%、7.5±0.9%、7.2±0.9%,各濃度用藥前后對比均
5、達(dá)到統(tǒng)計學(xué)差異,P<0.05。(4)在測試電壓+50mV的條件下,50,500μmol/LGFA使Ito最大峰值電流密度與用藥前比較分別降低了6.1±0.64%、8.6±1.13%,各濃度用藥前后對比均達(dá)到統(tǒng)計學(xué)差異,P<0.05。 結(jié)論(1)GFA在50-750μmol/L范圍內(nèi)對INa具有濃度依賴性阻滯作用,而且該作用具有使用依賴性;GFA對鈉通道激活態(tài)無影響;GFA抑制INa是作用于失活態(tài)而發(fā)揮作用;GFA減慢鈉通道失活后
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